[发明专利]一种生防真菌绿木霉及其代谢产物的应用

权利要求书

1.一种生防真菌绿木霉（Trichoderma virens）SS161，保藏号为CGMCC No.7224。

2.如权利要求1所述的一种生防真菌绿木霉SS161在防治水稻恶苗病、水稻立枯病、水稻纹枯病、水稻稻瘟病和水稻立枯病中的应用。

3.如权利要求1所述的一种生防真菌绿木霉SS161产生的代谢产物在防治土传种传病害中的应用，所述的土传种传病指对腐霉（Pythium）、绵霉（Achlya）、疫霉（Phytophthora）、镰刀菌（Fusarium）和丝核菌（Rhizoctonia）属真菌引起的土传种传病害，所述的代谢产物为孢子、孢子粉或孢子悬浮液。

4.如权利要求3所述的一种生防真菌绿木霉SS161产生的代谢产物在防治土传种传病害中的应用，其特征在于所述的代谢产物通过以下方法制得：绿木霉SS161接种固体PSA平板，28^oC培养7-15天，用无菌水洗下孢子，过滤去除菌丝，即为孢子悬浮液，孢子悬浮液冻干即为绿木霉SS161 孢子粉。

5.如权利要求3所述的一种生防真菌绿木霉SS161产生的代谢产物在防治土传种传病害中的应用，其特征在于所述的代谢产物通过以下方法制得：绿木霉SS161接种液体PSB培养基，28^oC培养6-10天，滤去菌丝即为孢子悬浮液，孢子悬浮液冻干即为绿木霉SS161 孢子粉。

6.如权利要求3所述的一种生防真菌绿木霉SS161产生的代谢产物在防治土传种传病害中的应用，其特征在于所述的代谢产物通过以下方法制得：营养液加入农用链霉素至终浓度为0.1%，带壳大麦或水稻谷粒在此营养液中浸8-12小时，装入两端开口的聚丙烯培养袋中，一端封口，121^oC，高压湿热灭菌15-20分钟，无菌操作台上自然冷却至室温，按照质量比20-30:1的比例加入种子液，混匀；放置在培养室支架上，室温保持在29±1 ^oC，培养10-15天，期间不断翻动、混匀培养袋，将结块的大麦或谷粒，捏碎；培养结束后，将培养物倒出，捣碎，摊放无菌塑料薄膜上，在无菌室内，30-32 ^oC黑暗条件下阴干，带壳大麦或谷粒上布满分生孢子，机械破碎后得到孢子粉，用吐温含量在0.02-0.1%的无菌水洗下孢子，双层纱布过滤够即得到孢子悬浮液；

上述的营养液含有：硝酸铵1.5g/L，磷酸氢二钾4.0g/L，磷酸二氢钾3.0g/L，氯化钠0.5g/L，氯化钙0.8g/L，硫酸镁1g/L，硫酸亚铁0.05g/L，硫酸锌0.03g/L，硫酸锰0.03g/L，硫酸铜0.03g/L，酵母粉40g/L，蔗糖50g/L；

上述的种子液由绿木霉SS161接种液体PSB培养基培养三天后得到。

7.如权利要求1所述的一种生防真菌绿木霉SS161产生的代谢产物在防治植物真菌性病害中的应用，所述的植物真菌性病害指水稻恶苗病、水稻纹枯病、水稻稻瘟病和水稻立枯病，所述的代谢产物为活性代谢产物。

8.如权利要求1所述的一种生防真菌绿木霉SS161产生的代谢产物在防治植物真菌性病害中的应用，其特征在于所述的代谢产物通过以下方法制得：代谢产物发酵培养基与种子液按照质量比20-30:1混合，在150转/分钟，28^oC下培养10-15天，培养液采用乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，利用旋转蒸发仪加热真空蒸发后获得膏状物即为活性代谢产物；

上述的代谢产物发酵培养基配方：硝酸铵1g/L，磷酸氢二钾8.0g/L，磷酸二氢钾6.0g/L，氯化钠0.5g/L，氯化钙0.8g/L，硫酸镁1g/L，硫酸亚铁0.05g/L，硫酸锌0.03g/L，硫酸锰0.03g/L，硫酸铜0.03g/L，蔗糖60g/L。

9.如权利要求1所述的一种生防真菌绿木霉SS161产生的代谢产物促进水稻发芽的应用，所述的代谢产物为孢子、孢子粉或孢子悬浮液。

10.如权利要求1所述的一种生防真菌绿木霉SS161，其特征在于该菌株rRNA基因序列如SEQ ID NO：1所示，该菌株转录延长因子的部分编码序列如SEQ ID NO：2所示。