[发明专利]一种哈茨木霉多元发酵方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体地说是一种可用于促作物提前开花、授粉和座果的哈茨木霉发酵制备方法及其应用。

背景技术

推进人们对农产品安全性认识，减少“化学肥料和有机合成农药（含植物生长调节剂）”对生态环境的污染，已成为当代各国的共同心声和追求的目标。随着化学肥料和有机农药通过农产品对人类健康产生的严重危害研究的深入，各国研究者正在积极寻找天然微生物肥料农药和作物开花结果调节物质。以前人们对木霉在生长过程中促作物生长调节、改善因长期使用化肥农药而使土壤结构破坏、污染农产品并危害人畜状况进行研究时，根据不同利用方法可采用不同的培养方式或工艺流程，以获得不同的产物，如里氏木霉（T.reesei）通过液体发酵可产生纤维素酶和动物源的糖蛋白，形成了一类重要的轻工业产业；在生物防治上，哈茨木霉（T.hariamum）、绿色木霉（T.Vide）、钩状木霉（T.hamatumi）是植物病原真菌的寄生菌或拮抗菌，可用于防治李属树银叶病的木霉制剂，同时利用其分生孢子制成产品防治白绢病，灰霉病、核菌立枯病、疫病等土传病害，被认为是以菌治菌最有希望的抗菌生物农药，在英、德、瑞典、俄以及美国等20余个国家均已走上商品化生产。特别令人注意的是美国和俄国科技人员在1986年就发现，在木霉生物农药和生物肥料的田间应用时，作物叶色浓郁，叶张变宽变绿，茎杆变粗壮，产量提高明显。美国科罗拉多州大学Windharma报道，在灭菌的土壤中添加木霉菌8周后，番茄和烟草的根与幼苗的总干重比对照组份分别增加213-275%和259-318%，萝卜的出苗率有所提高，萝卜长势好，前苏联的Buimistu也报道了木霉所产生刺激植物生长发育物质的田间试验情况。

近年来，由我国赵培洁等在木霉生物农药和生物肥料田间应用时也发现，许多作物使用木霉后，存在于Windharman和Buinislu所发现的类似现象。当有机物原料中植入木霉的分子和菌丝时，对肥料具有分解能力强，见效快、肥力持久等特点，而促进作物生长的物质（PGPS）主要存在于木霉液体培养基中。

发明内容

本发明的目的是提供一种哈茨木霉多元发酵方法及其应用，具体是将哈茨木霉加入不同效应物对应的培养液中生长，并合成出对作物不同生长阶段所需发酵液，以提高种子发芽率、果树坐果率、抗病害、抗逆性以及促进果树开花期提前。

本发明实现发明目的采用如下方案：

一种哈茨木霉发酵液的制备方法，其特征在于：按如下重量比配置培养基：

马铃薯1-5 %、血红蛋白0.5-3.3%、FeSO4 0.01-0.03%、KH2PO4  0.02-0.20 %、MgSO4 0.05-0.35%、CaSO4 0.05-0.1 %、ZnSO4 0.01-0.02 %，余量为水；所述培养基pH值调至5.7-6.5，然后将哈茨木霉接种在培养基中，于26-30℃±0.5℃条件下发酵培养5-10d；发酵终止后过滤分离，若发酵终止时，培养液pH大于等于4，则调pH小于等于4，静置6-8h后经虹吸吸取上清液，对下层胶状物过滤，滤液调至pH 6.2-6.4，得发酵液。

所述培养基按重量比由如下物质组成：马铃薯2-4 %、血红蛋白2-3%、FeSO4 0.015%、KH2PO4 0.05-0.15%、MgSO4 0.05-0.35%、CaSO4 0.05-0.1 %、ZnSO4 0.01-0.02 %，余量为水。

所述培养基按重量比由如下物质组成： 马铃薯3 %、血红蛋白2%、FeSO4 0.02%、KH2PO4 0.1%、MgSO₄ 0.2%、CaSO₄ 0.025 %、ZnSO₄ 0.01 %，余量为水。

所述培养基中血红蛋白的含量为1%，所述培养基中还含有2%几丁质；发酵终止后，所述滤液调至pH 6.2-6.4。

所述培养基中中CaSO₄由硼酸钠和亚硒酸钠代替，所述硼酸钠和亚硒酸按质量各占一半，发酵终止后，培养液pH值调节成6.2-6.4。

所述哈茨木霉为从自然界筛选或市场购得的产几丁质酶的哈茨木霉菌株。

本发明有益效果体现在：

本发明涉及适应农作物不同生长阶段所需物质可通过同一种真菌在不同效应物的诱导下进行发酵合成而获得。确切的说，是利用哈茨木霉在不同效应物的诱导下，进行发酵合成对作物不同生长发育阶段所需物质（如促进种子萌发，生长，抗逆，抗灰霉病等土壤病菌，促作物提前开花、授粉和座果），满足人们对作物增产的需要。

附图说明