[发明专利]一种水产品中组胺的快速检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种组胺的检测方法，尤其是涉及一种水产品中组胺的快速检测方法。

背景技术

组胺是一种具有生物活性的低分子含氮有机化合物，普遍存在于各类食品如发酵制品、乳制品、酒类、水产品及其制品中，尤其水产品最为突出。组胺作为人体内的一种化学传导物质，通过与细胞膜上的两类受体（H1和H2）作用而发挥毒性，如食入过量组胺，轻者引起过敏反应，重者将危机生命。一些蛋白含量较高的中上层鱼类如金枪鱼、鲭鱼、秋刀鱼等，若在其死后不加以合理控制，极易产生组胺，国内外报道的组胺中毒事件多发生在此类鱼中。同时，水产品中以鲐鰺、鲭鱼等易产组胺的中上层鱼类为原料的产品，因为组胺含量超标而被禁止出口的事件近年来时有发生，给水产品出口贸易带来很大影响。因此，为确保水产食品食用安全，促进水产品进出口贸易，亟需一个快速、精确、可靠的组胺检测方法。

目前，水产品中组胺的检测方法主要包括HPLC法、毛细管电泳法、比色法、生化传感器法、酶联免疫法、薄层色谱法等。这些方法一般都需要进行酸萃取，有机溶剂萃取等比较繁琐的前处理过程及衍生化过程，使得这些分析方法复杂、费时；薄层色谱虽然不需要昂贵设备，具有操作简单、快速、分析量大以及成本低廉的优点，但该法是半定量检测方法，只能用于组胺的监测及前期筛选。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种不需要复杂的前处理过程及繁琐的衍生化过程，可进行定性定量分析的简单快速的水产品中组胺的快速检测方法。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种水产品中组胺的快速检测方法，具体包括以下步骤：

（1）将鱼肉样品在冰浴下用组织捣碎机充分匀浆后，将鱼肉样品加入到带塞顶空样品瓶中，然后加入5倍鱼肉重量的蒸馏水、用NaOH溶液调节pH值为8.0-10.0，并加入氯化钠固体使其含量达到30wt%；

（2）将磁力搅拌吸附萃取棒加入步骤（1）的样品瓶中，盖上瓶盖，在电磁搅拌器上于30-45 ℃萃取0.5-3h，其中电磁搅拌速度为1000-1500r/Min；

（3）萃取完毕，将磁力搅拌吸附萃取棒用蒸馏水冲洗干净，用无尘吸水纸吸去磁力搅拌吸附萃取棒上的水分后，待用；

（4）组胺的分离分析

气相色谱分析条件：

带直接热解析进样系统的气相色谱仪Agilent6890气相色谱仪；

色谱柱：具备温度范围为280℃以上的键合固定相毛细管柱；

热解析进样系统一级热解析温度：280℃，时间5min，捕集温度-20—-30℃，二级热解析温度280℃， 时间3-5min，氢火焰离子化（FID）检测器温度300℃；

色谱柱柱温：150℃，保持2min；然后以15℃/min的速度升温至230℃，保留1min，再以50℃/min的速度升温至290℃，保留5min；

（5）标准曲线建立

采用内标法，在样品中加入不同浓度的组胺标准品和内标化合物1,9-壬二醇，在步骤（4）的气相色谱分析条件下，测出一系列不同浓度的组胺标准品对应的组胺峰面积，并根据内标化合物校正峰面积后，确定组胺的含量与组胺峰面积的定量关系，建立标准曲线；

（6）样品测定

根据上述步骤（1）-（4）获得待测样品的组胺峰面积，根据组胺的含量与组胺峰面积的定量关系，计算得到待测样品中的组胺含量。

所述的磁力搅拌吸附萃取棒表面设置有烯酸酯涂层 （PA：Polyacrylate）或者乙二醇硅酮(EG- Silicone : Ethylene Glycol (EG)-Silicone) 涂层 。由于这两个涂层是具有一定的极性，更适合组胺这种极性化合物的萃取。

所述的色谱柱采用OV-1701，其长×内径×膜厚度=30m×0.53mm×mm×1.5mm。

与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明公开了一种水产品中组胺的快速检测方法，采用无溶剂磁搅拌子吸附萃取技术结合在线热解析进样和GC分离检测技术直接对水产品中的组胺进行定量分析。由于组胺的沸点高达209.5℃，一般不能直接进行GC分析，需要进行分离纯化、再衍生化才能进行分析，本方法利用磁搅拌子吸附萃取技术的特点实现复杂水产品中的组胺的直接萃取，并通过使用耐高温的键合相毛细管气相色谱柱可实现高沸点化合物的分离，能够在不通过复杂的前处理过程及繁琐的衍生化过程的情况下直接分析样品中的组胺，检测极限达到50μg/kg，是一种简单快速、操作简便的无溶剂组胺萃取和无衍生化组胺分离检测相结合的组胺定性定量检测方法。

附图说明