[发明专利]一个高效抽提茄科类种子RNA的方法

权利要求书

1.一种高效抽提茄科类种子RNA的方法，其特征在于按如下步骤进行：

取茄科类植物的新鲜种子或干种子用质量百分比浓度为10~15%的次氯酸钠消毒10~15min后，用灭菌水清洗3~4次，将种子切开，加入液氮充分研磨成粉状；

取研磨后的样品80~100mg，加入灭菌的提取液和苯酚各100~120ul，充分涡旋，在冰水混合物中冰浴10~20min，离心；

离心后吸取上清液，按每毫升上清液添加500~600ul三氯甲烷/异戊醇混合液的比例在上清液中加入三氯甲烷/异戊醇混合液，充分涡旋，离心收集最上层的上清液，然后按每毫升上清液添加500~600ul苯酚/三氯甲烷混合液的比例在上清液中加入苯酚/三氯甲烷混合液，再抽提一次，离心，收集上清液；

按每毫升上清液中添加1ml异丙醇的比例在上清液中加入预冷至-20℃的异丙醇，混匀静置5~10min，离心，弃上清液，加入1~1.5ml质量百分比浓度为 75%的乙醇清洗，离心弃去乙醇后，即得胶体状RNA，干燥5~10min后用焦磷酸二乙酯溶液溶解，检测浓度后置于-20℃备用。

2.根据权利要求1所述高效抽提茄科类种子RNA的方法，其特征在于：提取液包括1% 的十二烷基肌氨酸钠、100mM 的Tris-HCl、280mM 的NaCl、10mM的 EDTA、10ul/ml的β-巯基乙醇，提取液的PH值为 8.5。

3.根据权利要求1所述高效抽提茄科类种子RNA的方法，其特征在于：三氯甲烷/异戊醇混合液中三氯甲烷与异戊醇的体积比为23:1~25:1。

4.根据权利要求1所述高效抽提茄科类种子RNA的方法，其特征在于：苯酚/三氯甲烷混合液中苯酚与三氯甲烷的体积比为1:1~1.2:1。