[发明专利]一种鉴定动物物种的方法和手段有效
申请号: | 201310062030.0 | 申请日: | 2013-02-27 |
公开(公告)号: | CN103305601B | 公开(公告)日: | 2019-12-06 |
发明(设计)人: | 郑淑娴;练进之 | 申请(专利权)人: | 香港城市大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888 |
代理公司: | 31220 上海旭诚知识产权代理有限公司 | 代理人: | 郑立;田嘉嘉<国际申请>=<国际公布>= |
地址: | 中国香港九龙*** | 国省代码: | 中国香港;HK |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 动物 物种 方法 手段 | ||
本发明提供了一种快速鉴定样品的一种或多种哺乳动物来源的方法。该方法包括但不限于下列步骤1)收集待测样品,2)处理该样品以用于鉴定,3)将该样品分成若干样品小份放入一个或多个多孔容器中,4)提供多个DNA探针,至少一部分DNA探针具有SEQ ID NOs.1‑241的DNA序列,其中样品小份的份数要大于DNA探针来源的哺乳动物物种的类型数。
相关申请
本申请要求申请日为2012年3月9日的美国专利申请No.61/608,824的优先权,该申请的内容被全部纳入于此。
技术领域
本发明涉及一种物种鉴定方法,尤其涉及建立一种相对快速的鉴定动物物种的方法,包括但不限于牛(Bos Taurus)、猪(Sus scrofa)、羊(Ovis aries)、马(Equuscaballus)、狗(Canis lupus)、鼠(Mus musculus)和猫(Felis Catus)。本发明还涉及实现该方法所使用的手段以及改造该手段的方法。
背景技术
由于各种各样的原因,鉴定样品的动物物种来源是有必要的。例如,在物证调查时,经常需要确认犯罪现场的动物组织样品的身份。在食品制造业的质量控制中,需要确认食品是否包含声称所包含的特定类型的动物的肉。使用动物物种来源或者动物组织的鉴定方法实际上还有许多其它可能的应用,可以预见这些应用在医学和制药工业中可能是非常有用的,当然这些应用对于解决食品安全问题也可能是非常有用的。
已经有许多方法试图满足动物物种鉴定的需要。虽然其中很多方法都具有独特的特征,但这些方法通常都具有缺陷并且往往只能解决部分问题而不能解决其它问题。例如,一些方法往往鉴定非常准确,但需要以非常复杂的步骤为代价。其它一些方法就步骤而言相对简单但通常要使用高端设备,这需要重大财政投资和受过专业培训的人员(例如高速DNA测序)。还有一些方法很容易掌握但鉴定所需要的时间太长,使得它们在商业上不切实际,因此无法实际使用。进一步的,当样品中包含多个来源的动物物种组织时,一些方法不能区分样本,或者至少它们不能在一个实验中区分样本。
本发明试图通过提供一种尽量平衡不同因素,或者至少提供一种可替换的平衡的方法和其手段来解决上述的问题。至少本发明试图为公众提供一种可替换的鉴定动物物种样品的方法和其手段。
发明内容
根据本发明的第一方面,提供了一种快速鉴定样品中一种或多种哺乳动物物种来源的方法,包含下列步骤:
a)收集待测样品;
b)处理该样品以用于鉴定;
c)将该样品分成若干样品小份放入一个或多个多孔容器中;
d)提供多个DNA探针,至少一部分DNA探针具有下面附录和补充序列表中示出的SEQ ID NOs.1-241的DNA序列或者至少同这些DNA序列具有98%的序列一致性,其中,样品小份的份数要大于这些DNA探针来源的哺乳动物物种的类型数;
e)选择一部分或全部DNA探针用于与样品小份进行杂交;
f)使样品小份同所选择的DNA探针同时进行预期杂交;
g)从样品小份和所选择的DNA探针的预期杂交中检测阳性杂交结果;并且
h)根据阳性杂交结果评估样品中一种或多种哺乳动物物种来源。
根据本发明的第二方面,提供了用于快速鉴定样品的一种或多种哺乳动物物种来源的试剂盒,该试剂盒包含许多来源于多个不同哺乳动物物种的DNA探针,至少其中一部分DNA探针具有SEQ ID NOs.1-241的DNA序列。在实施例中,DNA探针可以固定在合适的基底上,例如在杂交膜或者塑料井的壁上。
根据本发明的第三方面,提供了一种设计用于快速鉴定样品的一种或多种哺乳动物物种来源的DNA探针的方法,包含下列步骤:
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