[发明专利]一种产油酵母脂肪酸合酶及其编码基因与应用有效
申请号: | 201310067825.0 | 申请日: | 2013-03-04 |
公开(公告)号: | CN104031896A | 公开(公告)日: | 2014-09-10 |
发明(设计)人: | 赵宗保;朱志伟;张素芳 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;C12R1/645 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 陈晓娜 |
地址: | 116023 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 产油 酵母 脂肪酸 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种产油酵母脂肪酸合酶,其由RtFAS1亚基和RtFAS2亚基组成,其中所述RtFAS1亚基是如下(a)或(b)的蛋白质:
(a)由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(b)将SEQ ID NO:1的氨基酸经过一个或几个氨基酸的取代和/或缺失和/或添加且与具有脂肪酸合酶亚基1功能的由SEQ ID NO:1所衍生的蛋白质;
所述RtFAS2亚基是如下(c)或(d)的蛋白质:
(c)由SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(d)将SEQ ID NO:2的氨基酸经过一个或几个氨基酸的取代和/或缺失和/或添加且与具有脂肪酸合酶亚基2功能的由SEQ ID NO:2所衍生的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的产油酵母脂肪酸合酶,其中所述RtFAS1亚基的氨基酸序列为SEQ ID NO:1,所述RtFAS2亚基的氨基酸序列为SEQ ID NO:2。
3.一种来源于权利要求1所述的产油酵母脂肪酸合酶的生物活性多肽片段或结构域,所述多肽片段或结构域的氨基酸序列为选自如下片段中的任意一个或者任意两个或更多个片段的组合:
SEQ ID NO:1的位置190-599,
SEQ ID NO:1的位置611-1142,
SEQ ID NO:2的位置60-490,
SEQ ID NO:2的位置493-885,
SEQ ID NO:2的位置1021-1186,
SEQ ID NO:2的位置1212-1378,
SEQ ID NO:2的位置1725-1983,
SEQ ID NO:2的位置2066-2716,和
SEQ ID NO:2的位置2815-2926。
4.权利要求3所述的产油酵母脂肪酸合酶的生物活性多肽片段或结构域,其生物活性选自单酰/乙酰转移酶(AT)活性、烯酰ACP还原酶(ER)活性、脱水酶(DH)活性、丙二酰/棕榈酰转移酶(MPT)活性、第一酰基载体蛋白(ACP)活性、第二酰基载体蛋白(ACP)活性、酮脂酰还原酶(KR)活性、酮酯-酰基ACP合酶(KS)活性或磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(PPT)活性中的任一种或者任两种或更多种的组合。
5.编码权利要求1所述的产油酵母脂肪酸合酶的核苷酸序列。
6.根据权利要求5所述的核苷酸序列,其中编码所述产油酵母脂肪酸合酶的RtFAS1亚基的核苷酸序列为SEQ ID NO:3;编码所述产油酵母脂肪酸合酶的RtFAS2亚基的核苷酸序列为SEQ ID NO:4。
7.编码权利要求3所述的产油酵母脂肪酸合酶的生物活性多肽片段或结构域的核苷酸序列,其选自如下核苷酸序列中的任意一个或者任意两个或更多个序列的组合:
(a)如SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列,其编码RtFAS1亚基的AT结构域;
(b)如SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列,其编码RtFAS1亚基的ER结构域;
(c)如SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列,其编码RtFAS2亚基的DH结构域;
(d)如SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列,其编码RtFAS2亚基的MPT结构域;
(e)如SEQ ID NO:9所示的核苷酸序列,其编码RtFAS2亚基的第一ACP结构域;
(f)如SEQ ID NO:10所示的核苷酸序列,其编码RtFAS2亚基的第二ACP结构域;
(g)如SEQ ID NO:11所示的核苷酸序列,其编码RtFAS2亚基的KR结构域;
(h)如SEQ ID NO:12所示的核苷酸序列,其编码RtFAS2亚基的KS结构域;
(i)如SEQ ID NO:13所示的核苷酸序列,其编码RtFAS2亚基的PPT结构域。
8.含有权利要求5-7中任何一项所述的核苷酸序列的表达盒或重组表达载体。
9.含有权利要求5-7中任何一项所述的核苷酸序列的细胞。
10.一种构建油脂生产重组细胞的方法,所述方法包括将权利要求3-7中任何一项所述的核苷酸序列或者权利要求8的表达盒或重组表达载体导入宿主细胞中,得到油脂生产重组细胞。
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