[发明专利]生产L-蛋氨酸前体的微生物以及由L-蛋氨酸前体制备L-蛋氨酸和有机酸的方法

权利要求书

1.一种生产L-蛋氨酸和有机酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）通过培养删除或消弱参与L-蛋氨酸前体降解中的胱硫醚伽马合酶(cystathionine gamma synthase)或O-琥珀酰高丝氨酸硫化氢解酶(O-succinylhomoserine sulfhydrylase)或O-乙酰基高丝氨酸硫化氢解酶(O-acetylhomoserine sulfhydrylase)的活性的微生物，并通过发酵以生产作为L-蛋氨酸前体的O-酰基高丝氨酸的步骤；以及

2）生产L-蛋氨酸和有机酸的步骤，该步骤是通过将甲硫醇或其盐作为硫源和上述步骤中生产的O-酰基高丝氨酸作为底物，并且利用转化酶进行酶反应以生产L-蛋氨酸和有机酸。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述O-酰基高丝氨酸为O-乙酰基高丝氨酸(O-acetyl homoserine)或O-琥珀酰高丝氨酸（O-succinyl homoserine）。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中的L-蛋氨酸前体产生菌株，选自组成为埃希氏菌属、欧文氏菌属、沙雷氏菌属、棒状杆菌属、短杆菌属或酵母的组。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中的微生物选自埃希氏菌属和棒状杆菌属。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤1）中的微生物利用大肠杆菌或谷氨酸棒状杆菌。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述胱硫醚伽马合酶(cystathionine gamma synthase)或O-琥珀酰高丝氨酸硫化氢解酶(O-succinylhomoserine sulfhydrylase)或O-乙酰基高丝氨酸硫化氢解酶(O-acetylhomoserine sulfhydrylase)分别被metB或metZ或metY 或它们的突变基因编码。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤1）的微生物中进一步删除或消弱高丝氨酸激酶。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，编码所述高丝氨酸激酶的基因是thrB。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1）的微生物进一步提高从高丝氨酸合成L-蛋氨酸前体的渠道。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，在所述步骤1）的微生物中，进一步提高从高丝氨酸到包含在L-蛋氨酸前体合成渠道中的高丝氨酸O-琥珀酰基转移酶或高丝氨酸O-乙酰基转移酶的表达或活性。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述O-琥珀酰基转移酶通过metA基因编码，或高丝氨酸O-琥珀酰基转移酶通过metX基因编码。

12.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述表达或活性通过分离自反馈调节系统的高丝氨酸O-琥珀酰基转移酶或高丝氨酸O-乙酰基转移酶的诱导而提高。

13.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，为了在所述步骤1）的微生物中提高O-乙酰基高丝氨酸的合成，删除或敲除微生物菌株的该可靠的高丝氨酸O-琥珀酰基转移酶后，诱导或提高新的或可靠的高丝氨酸O-乙酰基转移酶。

14.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，为了在所述步骤1）的微生物中提高O-琥珀酰高丝氨酸的合成渠道，删除或敲除微生物菌株的该可靠的高丝氨酸O-乙酰基转移酶后，诱导或提高新的外部或可靠的高丝氨酸O-琥珀酰基转移酶。

15.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤2）中将L-蛋氨酸前体转化成蛋氨酸的酶反应由具有胱硫醚伽马合酶(cystathionine gamma synthase)或O-琥珀酰高丝氨酸硫化氢解酶(O-succinylhomoserine sulfhydrylase)或O-乙酰基高丝氨酸硫化氢解酶(O-acetylhomoserine sulfhydrylase)活性的酶，或具有这种酶活性的菌株所诱导。