[发明专利]一种抗Her2免疫细胞因子及其应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种抗Her2免疫细胞因子及 其应用。

背景技术

癌症是死亡率最高的疾病之一。我国每年新增癌症病人约200万人，其 中乳腺癌发病率在我国城区以平均每年递增4％的幅度上升。美国每年 有>18万妇女患乳腺癌，我国的年发病率尚无确切的统计资料，但根据 我国巨大的人口数量，年患病人数应远超过美国。

Her2是具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，属于I型生长因子受体家族 成员。Her2在乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、胃癌、肺癌等多种上皮细 胞来源的恶性肿瘤中过表达，而在正常组织中表达水平很低。因此， Her2是肿瘤免疫治疗的理想靶分子。自1998年美国FDA批准抗Her2抗体 （Herceptin）用于Her2过表达乳腺癌患者的临床治疗以来，乳腺癌的 分子靶向治疗已取得了较大的成绩，2007年Herceptin的销售额达到约 40亿美元。从抗体治疗的结果看，单用Herceptin作为临床一线用药的 有效率为15-30％，与化疗药物联合应用有效率可增至50%。但是，并 非所有Her2高表达的患者可从抗体治疗中受益，其中一半以上的患者 对Herceptin治疗不敏感，且在用药一年后，较大比例的Herceptin治 疗有效的患者出现耐药，导致治疗失败。Herceptin治疗无效及耐药的 机制尚不清楚，但研究表明，发展具有不同作用机制的新型靶向Her2 的药物，将填补现有产品治疗谱的空白，为更多的患者提供新的用药 选择。

例如，2007年美国FDA批准上市的Lapatinib是一种新型靶向Her2酪氨 酸激酶结构域的小分子药物，其作用机制与Herceptin不同。Lapatin ib单独应用的有效率为28%，但是作为二线药物用于Herceptin治疗失 败后的患者，有效率仍有8%，这一结果具有重要的实际意义，为Herc eptin耐药或治疗失败的患者带来了新的生存希望。专家预测，2010年 Lapatinib的年销售额达到10亿美元。又如正在进行Ⅲ期临床试验的治 疗性抗体Pertuzumab是新开发的Her2特异性抗体， 其作用位点与Herceptin不同，可结合于Her2二聚化功能域，阻止Her 2同源二聚体形成及与其他Her家族成员形成异源二聚体，从而阻断配 体激活的Her2信号传导。临床前研究表明，Pertuzumab对Her2低表达 的肿瘤亦有抑制作用。Pertuzumab的上市将为一大批Her2低表达、无 药可用的患者提供治疗选择的机会。不同作用机制的靶向药物抗肿瘤 谱具有互补性。在当前大力倡导循证医学及个体化治疗的实践中，发 展新型靶向Her2抗肿瘤药物十分必要，将为临床医师和广大患者提供 更为合理的用药选择。

白介素2（IL-2）是免疫反应中的重要介导分子，也是已知最强有力的 抗肿瘤细胞因子之一，具有广泛的生物学活性。然而，IL-2的全身用 药常在远离肿瘤部位的循环中产生高浓度，而在肿瘤局部的微环境中 却达不到治疗的最佳浓度。由于IL-2的全身用药可导致致命的副作用 ，这使IL-2的治疗剂量大受限制。如何提高细胞因子在肿瘤局部的有 效浓度，增强其抗肿瘤活性，同时避免全身性毒性反应一直是研究者 们努力的方向。

免疫细胞因子是利用基因工程方法构建的肿瘤特异性抗体与细胞因子 的融合蛋白。其作用机制与其它抗肿瘤靶向性生物技术药物不同。它 可利用抗体特异性的靶向功能，将具有抗肿瘤活性的细胞因子携至肿 瘤组织局部，以提高肿瘤局部的细胞因子浓度，在靶部位招募、刺激 免疫细胞，产生对肿瘤细胞的特异性杀伤，特别对于转移性病灶及微 小残留病灶的治疗具有很大的优越性。目前国外已有2种免疫细胞因子 正在进行I、II期临床试验。I期临床试验的结果表明，免疫细胞因子 可诱发机体的免疫激活，治疗剂量仅为7.5 mg/平方米/天，比普通抗 体治疗的用量减少了几十倍！

采用基因工程方法，已成功设计、构建含抗Her2 scFv、人IgG1的Fc 段、IL-2的融合蛋白（HF）。HF保留了识别ErbB-2抗原的能力及IL-2 的生物学活性。然而HF存在如下缺陷：1、生物学活性低；2、表达水 平低，不能用于规模化生产。这些缺陷使HF的临床应用受到了很大的 限制，急需对HF进行分子改造以克服规模化生产的瓶颈，使HF能应用 于Her2阳性的乳腺癌的临床治疗。

发明内容