[发明专利]防治小麦赤霉病的地衣芽孢杆菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物菌剂，具体地涉及防治小麦赤霉病的地衣芽孢杆菌及其应用。

背景技术

禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)，又称禾谷镰孢，可引起小麦、大麦、水稻、燕麦的穗枯或“穗疮痂”病和玉米的茎腐病与穗腐烂病，也称为赤霉病。禾谷镰刀菌引起的小麦赤霉病是世界性流行病害。小麦受到禾谷镰刀病菌的侵染后，病穗上往往出现粉红色或橘红色的霉状物，因此被称为赤霉病。赤霉病是温暖潮湿麦区广泛发生的一种病害，已在世界上五大洲30多个国家发生和流行。近年来，随着全球气候的变暖，还有蔓延扩散的趋势。

在我国，小麦赤霉病造成的损失仅次于小麦条锈病，且分布范围广泛。在世界范同内，赤霉病在美国中北部、加拿大南部、欧洲和南美地区都呈蔓延趋势。赤霉病会造成粮食严重减产和籽粒品质下降；同时，感病籽粒带有真菌毒素，导致小麦不适于磨粉和食用，也不能当作饲料麦销售，从而造成双重的经济损失。

随着化学农药不断施用所造成的病原菌抗药性产生、耐药性增强和农药残留等问题的出现，赤霉病的生物防治的优点逐渐显现，禾谷镰刀菌拮抗菌株的开发和抗菌株生物防治的研究已成为热点。

发明内容

本发明的目的是提供一种地衣芽孢杆菌及其在防治小麦赤霉病中的应用。

本发明从活性污泥中，分离纯化得到地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis UTM 110菌株。UTM110菌株于2013年1月8日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101），保藏号：CGMCC No.7098。

所述地衣芽孢杆菌UTM 110菌株的鉴定特征是：菌落形状不规则，具有波浪状边缘，表面粗糙不透明，有粘液珠，污白色；革兰氏阳性杆菌，能运动；芽孢椭圆或柱状，位于菌体中央或稍偏。SEQ ID NO.1为地衣芽孢杆菌UTM 110的16S rDNA序列。

所述菌株通过R2A培养基（蛋白胨0.5g，淀粉0.5g，葡萄糖0.5g，酵母粉0.5g，干酪素水解物0.5g，磷酸氢二钾0.3g，丙酮酸钠0.3g，硫酸镁0.024g,水1L，琼脂粉20%）分离培养。

生产菌株采用LB培养基（蛋白胨10g，酵母粉10g，氯化钠10g,水1L），28-35℃，培养24小时，发酵液5000rpm离心5分钟，得到上清液即可。

本发明还提供一种含有所述地衣芽孢杆菌UTM 110的菌剂。

所述菌剂的制备方法包括以下步骤：接种地衣芽孢杆菌UTM 110于LB培养液培养基中，置于28-35℃下培养24小时。其他培养基也可以使用，培养温度及时间可做适当调整，其他培养如R2A、PDA、KB等。扩繁后的菌液可做成水剂或粉剂，向有机肥中添加。菌剂含有地衣芽孢杆菌UTM 110的活菌数为10⁸/ml。

本发明的有益效果：本发明菌株经平板对峙实验证实该地衣芽孢杆菌能够有效抑制谷镰刀病菌的生长，环境安全性好，经发酵后可加入有机肥中，作为的微生物肥料使用，也可作为好氧堆肥的微生物菌种。

附图说明

图1为地衣芽孢杆菌UTM110菌株的系统发育树；

图2为地衣芽孢杆菌UTM110光学显微镜照片；

图3为地衣芽孢杆菌UTM110对禾谷镰刀菌丝的抑制作用，A显示地衣芽孢杆菌UTM110对禾谷镰刀菌丝较强的抑制作用，B为阴性对照。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。

若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

实施例1菌株的分离和培养

取污水处理厂活性污泥1g，溶于10ml无菌蒸馏水中，梯度稀释后涂布于R2A培养基（蛋白胨0.5g，淀粉0.5g，葡萄糖0.5g，酵母粉0.5g，干酪素水解物0.5g，磷酸氢二钾0.3g，丙酮酸钠0.3g，硫酸镁0.024g,水1L，琼脂粉20%），28℃培养，分离单菌落。

将禾谷镰刀菌接种在PDA平板上(去皮马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂10g，水1000ml)，28℃培养5-7天后备用。