[发明专利]抗烧烫伤感染多器官衰竭绿脓杆菌毒素疫苗无效
| 申请号： | 201310077983.4 | 申请日： | 2013-03-12 |
| 公开（公告）号： | CN103146734A | 公开（公告）日： | 2013-06-12 |
| 发明（设计）人： | 张国利;冯越;朱平;岳玉环;吴广谋;田园 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N15/70;C07K19/00;A61K39/02;A61K39/39;A61K38/16;A61P31/04 |
| 代理公司： | 长春市东师专利事务所 22202 | 代理人： | 张铁生 |
| 地址： | 130122 吉林省*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 烫伤 感染 器官 衰竭 绿脓杆菌 毒素 疫苗 | ||
1.一种融合蛋白基因HSP65-PEAⅠ，它是由结核杆菌热休克蛋白65的基因HSP65和PEA受体结合亚基基因PEAⅠ顺序连接制得。
2.根据权利要求1所述的一种融合蛋白基因HSP65-PEAⅠ，其特征在于：所述的抗PEA抗体受体结合亚基基因PEAⅠ，其碱基序列如序列表SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求1或2所述的一种融合蛋白基因HSP65-PEAⅠ其特征在于：所述的结核杆菌热休克蛋白65基因HSP65，其碱基序列如序列表SEQ ID NO.2所示。
4.根据权利要求1所述的一种融合基因HSP65-PEAⅠ，其碱基序列如序列表SEQ ID NO.3所示。
5.一种融合蛋白HSP65-PEAⅠ，它是由权利要求1所述的一种融合基因HSP65-PEA表达的蛋白。
6.根据权利要求5所述的一种融合蛋白HSP65-PEAⅠ，其特征在于：其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.4所示。
7.一种融合蛋白HSP65-PEAⅠ的制备方法，它包括以下步骤：
1）用引物：
Fh： GCCCATGGATGGCCAAGACAATTGCGTACGA
Rh：ACGAATTCTTAGCTAGCCATATGGAAATCCATGC
Fp： CGGAATTCCTGGTCGCCAGCCTCGGCC
Rp： CCCAAGCTTTTAGTCGACCTGGTTCCACGACAG
以含有PEA受体结合亚基和HSP65基因片段为模板；分别扩增PEA受体结合亚基基因片段PEAⅠ和基因片段HSP65；
2）将质粒pET28a和基因片段HSP65用NcoI和EcoRⅠ双酶切， T4 DNA连接酶连接，得到重组质粒pET28a-HSP65，再将重组质粒pET28a-HSP65和目的基因PEAⅠ用EcoRⅠ和HindⅢ酶切连接，得重组质粒pET28a-HSP65-PEAⅠ，
3）重组质粒pET28a-HSP65-PEAⅠ转化至大肠杆菌中表达、纯化。
8.一种融合蛋白HSP65-PEAⅠ疫苗，它是其碱基序列如序列表SEQ ID NO.4所示的融合蛋白。
9.权利要求5所述的一种融合蛋白HSP65-PEAⅠ在制备防治抗绿浓杆菌感染及烧烫伤感染多器官衰竭药物中的应用。
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