[发明专利]黄瓜粗线期染色体的制片方法

权利要求书

1.利用黄瓜粗线期染色体进行制片，其特征在于：

得到了分散度很高、且染色质结构特征明显的粗线期染色体，提高了黄瓜花药的利用率。

2.根据权利要求1所述的得到的分散度高和形态结构特征明显的黄瓜粗线期染色体，是通过以下方法获得的：

1)在黄瓜植株处于盛花期或盛花前期时，采摘花蕾，用E∶G(乙醇∶冰醋酸体积比＝3∶1)固定液固定24小时以上；

2)从固定好的花蕾中分离出花药，45％醋酸压片，临时片在Olympus BX41相差显微镜下观察，选择处于粗线期的花蕾，将剩余的花药取出用于下一步酶解；

3)用含有4％的纤维素酶和2％的果胶酶的混合酶液酶解处于粗线期状态的黄瓜花药，将酶解好的花药在冰水中后低渗30分钟，然后在E∶G固定液中固定24h以上；

4)取酶解好的花药，加入适量固定液制成悬浊液涂片，再利用火焰干燥法制片，镜检，挑选染色体分散度高的载玻片备用。

3.根据权利要求1所述的提高了黄瓜花药的利用率，是由于将黄瓜酶解好的一个花药在适量E∶G(乙醇∶冰醋酸)固定液中捣碎后吸取一定量的悬浮液进行涂片，通过这种方法，一个花药可以制作3-4张染色体载玻片，与以往的一个花药制作一张染色体载玻片相比，大大提高了黄瓜花药的利用率。