[发明专利]一种乙酰胆碱酯酶电化学生物传感器的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种乙酰胆碱酯酶电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

A、玻碳电极表面的预处理，得到已预处理的玻碳电极；

B、将A步骤中得到的玻碳电极与铂电极组成两电极系统，在多壁碳纳米管的四硼酸钠溶液中，在一定工作电位下，电沉积一段时间，使带负电的碳纳米管沉积到A步骤中得到的玻碳电极表面；

C、将B步骤中得到的玻碳电极浸入质量分数为0.5%的壳聚糖乙酸溶液中15 min，然后冲洗所述B步骤中得到的玻碳电极表面直至除去多余的壳聚糖溶液，待电极自然风干后，再浸入所述多壁碳纳米管的四硼酸钠分散液中15 min，冲洗掉玻碳电极表面多余的多壁碳纳米管分散液，自然风干，完成一次静电自组装；

D、重复C步骤的操作3-6次；

E、将D步骤中得到的玻碳电极洗净后烘干，浸入壳聚糖乙酸溶液中15 min，再洗去其表面多余的壳聚糖乙酸溶液，浸入100U的质量分数为0.5%，pH为5.0的乙酰胆碱酯酶溶液中，冲洗其表面，烘干后在玻碳电极表面滴加海藻酸钠溶液，在一定温度下滴加乙酰胆碱酯酶溶液，最后修饰浓度为氯化钙溶液，自然干燥即得乙酰胆碱酯酶电化学生物传感器。

2.根据权利要求1所述的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，所述A步骤具体为：将玻碳电极经过剖光处理后，在0.5mol/L的硫酸溶液中进行循环伏安法扫描10个周期，对其进行电化学活化预处理。

3.根据权利要求1所述的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，B步骤中：所述多壁碳纳米管的四硼酸钠溶液的质量浓度为10mg/mL，pH为9.18，所述工作电位为1.1～3.0V，所述一段时间为1-4h。

4.根据权利要求1所述的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，D步骤中：所述重复C步骤的操作为5次。

5.根据权利要求1所述的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，E步骤中：所述海藻酸钠溶液的质量分数为0.05~0.15%，所述氯化钙溶液的质量分数为0.5~3.0%，所述温度为20-50℃。

6.根据权利要求5所述的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，所述海藻酸钠溶液的质量分数为0.1%，所述氯化钙溶液的质量分数为1%，所述温度为40℃。

7.一种如权利要求1所述的电化学生物传感器应用于对有机磷类农药和氨基甲酸酯类农药的检测，其特征在于：所述有机磷类农药为对硫磷、甲胺磷和氧化乐果；所述氨基甲酸酯类农药为涕灭威、甲萘威和仲丁威。