[发明专利]基于β折叠肽的双亲多肽分子刷及其制备方法

权利要求书

1.一种基于β折叠肽的双亲多肽分子刷，其特征在于该分子刷的结构式为：

其中，n=33~60。

2.一种制备根据权利要求1所述的基于β折叠肽的双亲多肽分子刷的方法，其特征在于该方法的具体步骤为：

a.        将苄醇、质量百分比浓度为40%氢溴酸和L-谷氨酸按59~77:19~27:1的质量比混合后，在60~74 ℃下搅拌至形成均一稳定溶液后，冷却体系至30～40 ℃，加入三乙胺和乙醇按1： 5~ 7）的体积比形成的混合物，至沉淀析出，再置于5~10 ℃温度下使沉淀充分析出；再经抽滤，依次用乙醇、乙醚洗涤，干燥后，用百分比为5%的乙醇水溶液重结晶；所得晶体经NaHCO₃水溶液、乙醇、乙醚洗涤，干燥，得白色固体，即为H-Glu(Obzl)-OH，其结构式为：

b.       将步骤a所得H-Glu(Obzl)-OH溶于二氧六环和水按1：0.8~1.4的体积比配制成的混合溶液中，-10~-15 ℃温度下缓慢滴加质量百分比浓度为10%的NaHCO₃水溶液，再加入Boc₂O后，在室温下搅拌过夜；其中Boc₂O、NaHCO₃水溶液和H-Glu(Obzl)-OH的质量比为：1.1~1.6:1.8~2.4:1调节pH值至3~4，乙酸乙酯萃取，干燥得白色固体，即为Boc-Glu(Obzl)-OH，其结构式为：

c.       将步骤b所得Boc-Glu(Obzl)-OH与对硝基苯酚按1:0.5~1:0.7的质量比溶于二氯甲烷，在惰性气氛下护，在-10~-15 ℃温度下缓慢加入EDC（1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐），其中EDC的用量为Boc-Glu(Obzl)-OH质量的0.6~0.9倍；搅拌反应过夜，待反应结束旋干体系，经分离纯化，得白色固体，即为Boc-Glu(Obzl)-ONp，其结构式为：

d.       将苯丙氨酸和N,N-二异丙基乙胺按1:2.2~1:3.0的质量比溶于二氯甲烷中，惰性气氛下，在-10~-15 ℃温度下，缓慢节哀如步骤c所得的Boc-Glu(Obzl)-ONp的二氯甲烷溶液，其中苯丙氨酸与Boc-Glu(Obzl)-ONp的质量比为：1:2.8~1:3.7；搅拌反应过夜，调节pH值至3~4，二氯甲烷萃取，经分离纯化，得白色固体，即为Boc-EF-OH，其结构式为： 

e.       将步骤d所得Boc-EF-OH和五氟苯酚按1:0.4~0.6 的质量比溶于二氯甲烷中，在惰性气氛下，在-10~-15 ℃温度下，缓慢加入EDC（1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐），搅拌反应过夜，其中EDC的用量为Boc-EF-OH质量的（0.5~0.9）；待反应结束水洗、二氯甲烷萃取、干燥、旋干，得白色固体Boc-EF-OPfp ，其结构式为： 

f.        将步骤d所得Boc-EF-OH溶于三氟乙酸和二氯甲烷按1： 0.8~ 1.4的体积比配成的混合溶液中，-10~-15 ℃温度下搅拌4~5小时，加入甲醇终止反应，旋干得浅黄色发泡固体，即为H-EF-OH ，其结构式为： 

g.       将步骤f所得H-EF-OH和N,N-二异丙基乙胺按1:1.1~1~1.9的质量比溶于二氯甲烷中，在惰性气氛下，在-10~-15 ℃温度下，缓慢加入步骤e所得的Boc-EF-OPfp的二氯甲烷溶液，其中H-EF-OH与Boc-EF-OPfp的质量比为：1:1.3~1:1.6；反应过夜，调节体系pH至3~4，二氯甲烷萃取干燥旋干，经分离纯化得白色固体，即为Boc-(EF)₂-OH ，其结构式为： 

h.       将步骤g所得Boc-(EF)₂-OH和五氟苯酚按1:0.3~1:0.4的质量比于二氯甲烷中，惰性气氛下，在-10~-15 ℃温度下，缓慢加入EDC（1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐），其中EDC与Boc-(EF)₂-OH 的质量比为0.3:1~0.5~1；反应过夜，二氯甲烷萃取、干燥、旋干，得白色固体，即为Boc-(EF)₂-OPfp ，其结构式为： 

i.        将步骤g所得Boc-(EF)₂-OH、HEMA（甲基丙烯酸羟乙酯）和4-二甲氨基吡啶按1：0.2~0.3 ：0.01~0.025的质量比溶于二氯甲烷中，在惰性气氛下，在-10~-15 ℃温度下，缓慢加入EDC（1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐），其中EDC 与Boc-(EF)₂-OH 的质量比为1：0.3~0.4，反应过夜，旋干、分离纯化、旋干后再经二氧六环冻干，得白色固体，即为Boc-(EF)₂-HEMA ，其结构式为：

j.        将步骤i所得Boc-(EF)₂-HEMA溶于质量百分比浓度为25%的氯化氢/乙酸乙酯混合溶液中，搅拌反应0.5~1小时，旋干，得浅黄色发泡固体，即为H-(EF)₂-HEMA , 其结构式为： 

k.       将步骤j所得H-(EF)₂-HEMA和N,N-二异丙基乙胺按1:0.3~0.6的质量比溶于二氯甲烷中，在惰性气氛下，-10~-15 ℃下搅拌反应20~30 min，再缓慢加入步骤h所得的Boc-(EF)₂-OPfp的二氯甲烷溶液，其中Boc-(EF)₂-OPfp与H-(EF)₂-HEMA的质量比为：1:1.1~1.5，反应过夜，蒸出溶剂，分离提纯后，得白色固体，即为Boc-(EF)₄-HEMA，其结构式为： 

l.        将步骤k所得Boc-(EF)₄-HEMA和偶氮二异丁腈（为单体质量的0.3%~1.5%）溶于二甲基亚砜中，65~75 ℃搅拌反应20~30小时，用乙酸乙酯/二甲基亚砜混合液沉淀离心，蒸干后得白色固体，即为P-(EF)₄-Boc ，其结构式为：

m.     将步骤l所得P-(EF)₄-Boc溶于三氟乙酸中，-10~-15 ℃下搅拌，再加入溴化氢/乙酸的混合溶液，P-(EF)₄-Boc与混合溶液的质量比为1:5~9，反应6~8小时，旋干体系，得淡黄色固体，即为P-(EF)₄-H ，其结构式为： 

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