[发明专利]一种优良食味品质转基因水稻及培育方法有效
申请号: | 201310087162.9 | 申请日: | 2013-03-18 |
公开(公告)号: | CN103146746A | 公开(公告)日: | 2013-06-12 |
发明(设计)人: | 刘巧泉;李娟;张昌泉;蒋美艳;于恒秀;顾铭洪 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/113;A01H5/00 |
代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 卢亚丽 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 优良 品质 转基因 水稻 培育 方法 | ||
1.一种优良食味品质转基因水稻的培育方法,其特征在于:构建SSSIIb基因RNA干扰载体,利用农杆菌介导的方法将干扰载体导入水稻,获得干扰SSSIIb 基因的转基因水稻。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于步骤如下:
(1)以序列如SEQ ID NO.2和3的引物对,扩增得到序列如SEQ ID NO.1的片段;
(2)构建RNA干扰载体:利用植物组成型表达启动子,构建含SEQ ID NO.1序列正反向片段的植物表达载体;
(3)将步骤(2)的RNA干扰载体导入水稻品种中,获得转基因水稻。
3.如权利要求3所述的方法,其特征在于步骤(2)是:扩增产物经 T/A 克隆连接入pMD18-T载体,用BamHⅠ和 XbaⅠ双酶切回收目的片段I;将目的片段I通过BglⅡ和 XbaⅠ双酶切位点插入载体p1011得到p1011-I;再将目的片段I通过 BamHⅠ和SpeⅠ双酶切位点插入载体p1011-I,获得RNA干扰载体。
4.一种转基因水稻,其特征在于通过下述方法获得:构建SSSIIb基因RNA干扰载体,利用农杆菌介导的方法将干扰载体导入水稻,获得干扰SSSIIb 基因的转基因水稻。
5.如权利要求4所述的转基因水稻,其特征在于通过如下步骤得到:
(1)以序列如SEQ ID NO.2和3的引物对,扩增得到序列如SEQ ID NO.1的片段;
(2)构建RNA干扰载体:利用植物组成型表达启动子,构建含SEQ ID NO.1序列正反向片段的植物表达载体;
(3)将步骤(2)的RNA干扰载体导入水稻品种中,获得转基因水稻。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于步骤(2)是:扩增产物经 T/A 克隆连接入pMD18-T载体,用BamHⅠ和 XbaⅠ双酶切回收目的片段I;将目的片段I通过BglⅡ和 XbaⅠ双酶切位点插入载体p1011得到p1011-I;再将目的片段I通过 BamHⅠ和SpeⅠ双酶切位点插入载体p1011-I,获得RNA干扰载体。
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