[发明专利]LOLP-1蛋白和用于癌症的诊断等的试剂盒

说明书

技术领域

本文涉及医药生物技术领域，具体地说，涉及了一种人类肿瘤特异性抗原莱拓福蛋白-1(Light of life protein-1，LOLP-1蛋白)，以及一种用于癌症的早期诊断、诊断、治疗指导、预后判断或复发监测的试剂盒。

背景技术

乳腺癌、肺癌、肠癌、甲状腺癌和肝癌等癌症均是目前多发和常见的癌症，并且致死率非常高。目前尚缺乏有效地针对乳腺癌、肺癌、肠癌、甲状腺癌和肝癌患者的早期诊断、诊断、治疗指导、预后判断或复发监测的方法。因此，急需新的特异性高、敏感性高、易操作的、对人体无危害、能在癌症发病的早期及时诊断、并且对于治疗指导、预后判断或复发检测等具有实用价值的靶标和检测评估方法。

发明内容

针对上述问题，本发明人从人类原发性肿瘤组织中分离鉴定出一个新的特异性蛋白，即人类肿瘤特异性抗原莱拓福蛋白-1(Light of life protein-1，LOLP-1蛋白)。该蛋白质由316个氨基酸组成，在除消化道外的正常成体组织中几乎不表达。但经本发明人的研究发现LOLP-1蛋白在人类肝癌、肺癌、乳腺癌及甲状腺癌中过度表达。相反，LOLP-1蛋白在人的正常消化道组织中高表达，但是在肠癌组织中低表达或不表达。

本发明人进一步进行了深入地研究，获得了一种新的蛋白质以及编码该蛋白质的核苷酸序列，并利用该蛋白质或其核苷酸序列的特异性，开发用于癌症的早期诊断、诊断、治疗指导、预后判断或复发监测的试剂盒，

具体而言，本文涉及如下内容：

1.一种人类肿瘤特异性抗原莱拓福蛋白-1(LOLP-1蛋白)，其由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成。

2.编码LOLP-1蛋白的DNA，其由SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或 其互补序列构成。

3.一种重组载体，其包括项2的重组载体。

4.一种转化体，其是将项3所述的重组载体导入宿主细胞而得到的转化体。

5.一种用于癌症的早期诊断、诊断、治疗指导、预后判断或复发监测的试剂盒，其包含特异性检测LOLP-1蛋白的试剂。

6.项5所述的试剂盒，其中，所述特异性检测LOLP-1蛋白的试剂是特异性识别LOLP-1蛋白的抗体。

7.项6所述的试剂盒，其中所述LOLP-1蛋白由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列构成。

8.项5-7中任一项所述的试剂盒，其中所述试剂可用于检测血清、尿液、乳汁和肠液等体液，大便或组织样本。

9.项5所述的试剂盒，其中，所述特异性检测LOLP-1蛋白的试剂是特异性识别LOLP-1蛋白核酸的引物或探针。

10.项9所述的试剂盒，其中，所述LOLP-1蛋白核酸由SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或其互补序列构成。

11.项5-10中任一项所述的试剂盒，其中所述试剂盒还包含LOLP-1蛋白或核酸标准品。

12.项5-11中任一项所述的试剂盒，其中所述癌症选自下组：肝癌、肺癌、肠癌、甲状腺癌和乳腺癌。

13.项5-8中任一项所述的试剂盒，其中所述试剂盒是酶联免疫法吸附测定(ELISA)试剂盒、时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)试剂盒、化学发光检测试剂盒。

14.项13所述的试剂盒，其包括：

包被有LOLP-1蛋白的特异性捕获抗体的ELISA板；

生物素标记的另一种属来源的LOLP-1蛋白的特异性检测抗体；该捕获抗体与检测抗体均可与LOLP-1蛋白结合。

15.项14所述的试剂盒，其还包括：

包被缓冲液(1×PBS，pH7.3±0.1)；

样品稀释液(1×PBS、1%BSA、0.05%NaN₃，pH7.3±0.1)；

封闭液(1×PBS、3%BSA)；

洗脱液PBST(1×PBS、0.05%Tween-20)；

Streptavidin-HRP或者Streptavidin-Eu。

16.根据项14或15的试剂盒，其中捕获抗体和检测抗体是利用LOLP-1蛋白免疫动物获得的纯化抗体或单克隆抗体。

17.根据项14-16中任一项的试剂盒，其中检测抗体的生物素标记效率(生物素/抗体)为5-10。