[发明专利]大熊猫孕酮浓度值的快速检测方法无效
申请号: | 201310092282.8 | 申请日: | 2013-03-21 |
公开(公告)号: | CN103207279A | 公开(公告)日: | 2013-07-17 |
发明(设计)人: | 罗娌;侯蓉;张志和;黄河;王成东;黄祥明;兰景超 | 申请(专利权)人: | 成都大熊猫繁育研究基地 |
主分类号: | G01N33/74 | 分类号: | G01N33/74 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 610081 四川省*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 大熊猫 孕酮 浓度 快速 检测 方法 | ||
1.一种大熊猫孕酮浓度值的快速检测方法,包括以下步骤:
(1)对雌性大熊猫进行尿样收集,在尿样上标记后进行冷冻或冷藏保存;
(2)用孕激素抗体CL425将96孔酶标板包被6~48小时;
(3)将孕酮标准品和尿样稀释后,分别按顺序依次加入到已经包被好的96孔酶标板孔中;在96孔酶标板孔中加入Horseradish peroxidase溶液,在37℃下孵育0.5小时后,用洗液洗涤96孔酶标板;
(4)将H2O2和ABTS加入到柠檬酸底液中,混合均匀成显色溶液;
(5)往洗涤后的96孔酶标板孔中加入已配制好的显色溶液,室温下孵育30~60分钟后用酶标仪读取光吸收值,所得数值为该大熊猫孕酮值;
(6)将尿样和肌酐标准品稀稀释后分别按顺序依次加入到96孔酶标板中,再在96孔酶标板孔中加入NaOH和苦味酸,在室温下孵育10~20分钟后,用酶标仪检测光密度值,所得数值为该大熊猫尿样肌酐值;
(7)用测到的该大熊猫孕酮值除以该大熊猫肌酐值,所得结果为该大熊猫孕酮浓度值。
2.根据权利要求2所述的一种大熊猫孕酮浓度值的快速检测方法,其每一次大熊猫尿样收集包括以下步骤:
(1)清洁并拖干兽舍地面;
(2)将需收集尿样的大熊猫放入兽舍,工作人员守候,一旦大熊猫排出小便,立即将大熊猫放到其它兽舍;
(3)用清洁注射器采集地面新鲜尿样,装入冷冻管,做好标记,然后立即放入冰箱冷冻或冷藏。
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