[发明专利]一种仙台病毒抗原肽及其在仙台病毒感染检测中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种仙台病毒抗原肽及其在仙台病毒感染检测中的应用。

背景技术

仙台病毒（Sandaivirus）属于副粘病毒科副粘病毒亚科、呼吸道病毒属病毒，为单股负链RNA病毒，是一种实验啮齿类常见和高发的感染性副流感病毒，是引起啮齿类动物呼吸系统疾病的主要病原，小鼠、大鼠、仓鼠和豚鼠等啮齿类实验动物均易感。仙台病毒多数情况下无明显临床表现，但会对实验动物的免疫系统产生影响，在合并其他细菌性病原体的感染后造成致死性的影响，是啮齿类实验动物必须排查的病原体，其传染性强，容易扩散，在多数情况下呈隐性感染，可影响幼鼠发育成长和降低成年鼠的繁殖率，改变体内细胞免疫反应，且很难从鼠群中清除。1953年在日本仙台的一次新生儿肺炎流行中首次分离出，又名Hemagglutinating virus of Japan(HVJ)，即Fushimi株。由于许多特性与流感不同，以后又陆续分离到其他毒株，故命名为副流感病毒。

仙台病毒几乎可凝集所有种类的红血球，而且有溶血性。其表面具有血凝素和溶血素，溶血素有溶细胞作用，能溶解某些动物的红细胞，与病毒的感染性有关，血凝素则能凝集某些哺乳类和禽类的红细胞。仙台病毒感染可侵犯呼吸道的表层组织，在上皮细胞中增殖，所致的免疫反应不牢固易再次感染，成人中通常引起轻型呼吸道感染，而5岁以下儿童发病率高、病情重，表现为急性阻塞性喉-支气管-气管炎和肺炎。由于仙台病毒不仅感染动物，而且还会导致儿童患严重的呼吸道疾病，所以开发一种能够及时的、准确的检测仙台病毒感染的产品，对动物和人类的健康具有重要意义。

目前的检测多采用血清学的方法包括ELISA、IFA以及血凝抑制实验等。这些血清学的检测方法比较经典，在实际应用中却存在一些问题，而最为主要的是血清学检测使用的抗原质量的稳定性和适用性。在血清学检测中最为关键的因素是抗原的质量。抗原的特异性和代表性，抗原的免疫原性和抗原性，这些因素均会影响到最终对血清学检测结果的判定。近年来随着多肽展示技术的应用，已经针对许多病原体的特异抗原表位进行了相关分析，也找到了一些有用的多肽表位，有些在微生物检测中也得到了应用。使用的线性表位多肽库，虽然不能包含天然空间构象表位，但是仍有许多线性表位具有良好的抗原性，多个抗原表位的组合可以很好的满足血清学检测的需要。

在目前的国家标准推荐的检测方法中使用病毒全颗粒作为抗原物质来检测实验动物血清中可能存在的抗体。但是由于病毒全颗粒在实验室的扩增培养以及分离纯化等过程中存在着许多的变量，包括病原体本身的变异、每次生产病毒可能掺入的非特异性抗原成分等，这些因素均会影响到抗原的稳定性。虽然病毒全颗粒保证了全部抗原位点的存在，但是抗原暴露的不同方式也会影响到抗原表位的展示最后影响检测工作的结果。而且病毒全颗粒抗原会和其他病原体的产生交叉抗原最终影响检测的准确性。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种仙台病毒抗原肽及其在仙台病毒感染检测中的应用，本发明提供的仙台病毒抗原肽提高了多肽组合的特异性和针对性，因此可提高实验动物微生物检测的准确性。

本发明提供了一种仙台病毒抗原肽，具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。

本发明还提供了一种仙台病毒抗原肽，具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中取代、缺失或添加一个或多个氨基酸残基得到的氨基酸序列。

优选地，本发明提供的仙台病毒抗原肽的氨基酸序列与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的同源性大于85%。

本发明提供的抗原肽是仙台病毒的优势抗原表位，且分子量较小，因此降低了与其他分子发生交叉反应的可能，提高了多肽组合的特异性和针对性，从而提高了对仙台病毒感染检测的准确率。

本发明提供了一种编码SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的DNA分子，具有如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。

本发明还提供了一种仙台病毒疫苗，包括本发明提供的仙台病毒抗原肽及药学上可接受的辅料。

本发明提供的仙台病毒疫苗中抗原肽为具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中取代、缺失或添加一个或多个氨基酸残基得到的氨基酸序列。

优选地，本发明提供给的仙台病毒疫苗的剂型为口服制剂或注射剂。

由于本发明提供的抗原肽是仙台病毒的优势抗原表位，所以在制备疫苗时，可减少仙台病毒对动物的危害。

本发明提供的仙台病毒抗原肽在仙台病毒感染检测中的应用。