[发明专利]一种基于点击化学的便携式检测铜离子浓度的方法

权利要求书

1.一种基于点击化学的便携式检测铜离子浓度的方法，其特征在于：按照以下步骤进行：

（1）制备浓度为0.3μM的修饰有炔基和蔗糖转化酶的DNA化合物；

（2）将修饰有链霉亲和素的磁珠溶于由0.1M NaCl、0.1M pH=7.3的PBS、0.05% Tween-20组成的缓冲溶液中，加入0.3μM修饰有生物素的DNA，室温振荡30±1分钟，制备修饰在磁珠上的DNA化合物；

（3）将步骤（1）与（2）制备的修饰有炔基和蔗糖转化酶的DNA化合物与修饰在磁珠上的DNA化合物以摩尔比1:1混合，加入待测样品和抗坏血酸钠，室温培育1.5±0.5小时；

（4）用磁铁分离步骤（3）中的磁珠与混合溶液，用缓冲溶液洗涤磁珠三次，洗涤后的磁珠中加入10μL缓冲溶液，再加入20μL 1M蔗糖溶液，于40℃反应15分钟；

（5）用血糖仪配合血糖仪试纸测定步骤（4）反应后的溶液，记录数据；

（6） 以已知铜离子浓度为横坐标，其对应的血糖仪读数为纵坐标，绘制曲线，得到铜离子浓度和血糖仪读数的线性方程，然后根据待测样品的血糖仪读数，计算对应的铜离子浓度。

2.根据权利要求1所述的基于点击化学的便携式检测铜离子浓度的方法，其特征在于步骤（1）中所述的修饰有炔基和蔗糖转化酶的DNA化合物的序列为从左到右5’到3’：炔基-TGTCCGTAGCTAAAAAAAAAAAAA-转化酶。

3.根据权利要求1所述的基于点击化学的便携式检测铜离子浓度的方法，其特征在于步骤（2）中所述的修饰有生物素的DNA的序列为从左到右5’到3’：生物素-AAAAAAAAAAAATCACAGATGAGTAGT-叠氮基。

4.根据权利要求1所述的基于点击化学的便携式检测铜离子浓度的方法，其特征在于步骤（3）中抗坏血酸钠的加入量为0.6mM。

5.根据权利要求1所述的基于点击化学的便携式检测铜离子浓度的方法，其特征在于：所述铜离子浓度和血糖仪读数的线性方程Y=0.86807+1.66028lgX，其中Y为血糖仪读数，单位为mM；X为其所对应的铜离子浓度，单位为pM。