[发明专利]一种中药水蛭提取物及其用途

说明书

技术领域

本发明公开了一种中药水蛭提取物及其用途，属中药领域。 

背景技术

水蛭为中国药典收载的药材品种，功能破血，逐瘀，通经，用于癥瘕痞块，血瘀经闭，跌扑损伤。水蛭始载于《神农本草经》，“主逐恶血，瘀血，月闭，破血瘕积聚，无子，利水道”。由于近年来对活血化瘀治疗各种疑难病的不断深入研究，水蛭的药用也倍受青睐。 

水蛭作为传统中药，在心脑血管临床应用很广泛，在入药的方式上通常采用原药材粉碎后直接服用，或水提或醇提或水提醇沉后服用，其所采取的提取方法比较传统。在中医临床上用单味水蛭或配伍复方，口服给药，治疗心脑血管疾病疗效显著，然而临床疗效确切的水蛭制剂多为干燥药材原粉制成的中成药，或经水煎煮提取制得的粗提物，水蛭药材利用率较低，活性物质没有获得充分的利用。现代研究较多的是水蛭中的水蛭素类成分，其作用较强，研究较为透彻，但水蛭素类成分只存在于吸血类水蛭中，在蚂蟥、柳叶蚂蟥等非吸血水蛭中不含水蛭素类成分，而且水蛭素在口服后易破坏失活。在临床应用中，蚂蟥、柳叶蚂蟥等非吸血水蛭及水蛭等吸血水蛭口服后的作用疗效确切，说明水蛭等动物药还有另一些活性成分或部位。人体经口服水蛭后，经胃肠道的酶解、消化，以小分子肽类成分吸收入血发挥疗效。水提、水提醇沉或醇提的提取工艺使大分子量的蛋白变性，不溶入水、醇，未被溶出，被滤过除去，造成大量的药材浪费，疗效同样大大降低。 

本专利以蚂蟥(中药水蛭的来源品种)为原料，应用酶法酶解水蛭中的蛋白质，获得具有生理活性的生物活性肽。由于不同的酶水解的部位不一样，得到的酶解产物也大不相同，比如胃蛋白酶主要酶解的部位为苯丙氨酸、酪氨酸和亮氨酸组成的肽键，胰蛋白酶主要酶解的部位为精氨酸、赖氨酸等碱性氨基酸组成的肽键。本专利为保证所酶解的水蛭小肽的疗效，并能保证不引起人体的排异反应，采用模仿人体经口服水蛭经胃肠道的酶解、消化，以小分子肽类成分吸收入血发挥疗效的过程，将水蛭采用胃蛋白酶、胰蛋白酶双酶连续酶解法进行酶解，并进一步纯化制备成冻干粉针剂直接注入血管治疗疾病，如此则与口服水蛭所吸收入血的成分组成相同，而且药材利用率更高，保证了水蛭药材的有效成分充分被利用。 

经查阅已有专利，申请号为“200810138936.5”的专利，其权利要求为取水蛭加水匀浆后加入胰蛋白酶或/和胰酶酶解，加乙醇或/和丙酮冷藏沉淀，上清液通过分子截留量为5000Da的超滤膜，超滤液再通过阴离子交换树脂，脱盐，浓缩，喷雾干燥或冷冻干燥得到水蛭提取物。此专利中为采用胰蛋白酶或/和胰酶对水蛭进行酶解得到的分子量小于5000Da的肽部分，肽的末端为精氨酸、赖氨酸等碱性氨基酸残基(胰蛋白酶或/和胰酶酶切部位)，其余精制方法如醇沉或/和丙酮冷藏、超滤、阴离子交换树脂纯化等技术为医药领域内的常用手段，本专业的人员都已掌握并使用；而本专利根据人体消化吸收过程，采用胃蛋白酶、胰蛋白酶双酶连续酶解法进行酶解所得的小肽片段，小肽的末端一侧为苯丙氨酸、酪氨酸和亮氨酸等脂肪族氨基酸残基(胃蛋白酶酶切部位)，另一侧为苯丙氨酸、酪氨酸和亮氨酸残基(胰蛋白酶酶切部位)，其组成成分的分子量相对更小，组成小肽的物质群是与上述专利不一致的，即是另一类新物质。故本专利与上述专利是针对水蛭中的不同物质的提取、纯化手段，不影响本专利的申请。 

申请号为“CN200510080314.8”的专利，为将水蛭采用匀浆法提取出活性物质并进一步纯化制成冻干粉针剂，其为分子量更大的蛋白质或稍偏小一些的多肽，其相对分子质量一般在10KDa以上，而本专利所针对的是连续酶解所得的相对分子质量在3KDa以下的偏酸性的小肽，故此专利与本专利的物质基础是不一致的，不影响本专利的申请。