[发明专利]水稻转录因子Os11g01130基因的应用

权利要求书

1.一种水稻转录因子Os11g01130的基因，是下面（a）或（b）定义的多核苷酸：

（a）如SEQ No:1所示核苷酸序列的多核苷酸；

（b）在严格条件下与SEQ No:1所示核苷酸序列的DNA杂交的多核苷酸。

2.一种载体的构建方法，其特征在于，步骤如下：

（a）在植物转录因子数据库中找到Os11g01130基因，根据其序列设计PCR扩增引物对，其为正向引物F：5'-CAAAAAAGCAGGCT TCATGCCTCAGACCCCTTCGA-3'和反向引物R：5'-CAAGAAAGC TGGGTCTTAATTGGTGGAGGTGGAGCAAG-3'；

（b）以野生日本晴水稻总cDNA为模板，进行PCR获得Os11g01130全序列；

（c）将PCR产物克隆到连接PDONER克隆载体上，经测序鉴定得到与目的基因完全相同的序列；

（d）以双元表达载体pCAMBIA1300左右边界包含的序列为骨架序列，通过体外重组，将ubi promoter-VP64-Gateway表达单元、35Spromoter-asRED表达单元和35S promoter-hyg表达单元与之融合构建，得到载体nVP64-hyg-asRED的全序列如SEQ ID No.4所示；

（e）通过LR反应将Os11g01130构建到其目地基因的N端融合了VP64标签的植物表达载体nVP64-hyg-asRED上，获得载体ubi：VP64-Os11g01130，载体全序列如SEQ ID NO.5所示。

3.权利要求2所述方法构建得到的载体。

4.如权利要求3所述的载体，其特征在于，可通过使用Ti质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、微注射或电穿孔的常规生物技术方法导入植物细胞中。

5.一种转基因水稻植株的构建方法，其特征在于，采用农杆菌介导的方法利用pCAMBIA1301将权利要求3所述载体转入水稻愈伤组织中，用含诱导剂和农杆菌的AAM转化液进行转化，转化后的材料经过共培养-脱菌-筛选-分化-生根-转基因苗的锻炼和移栽，用潮霉素筛选转基因水稻植株。

6.一种融合蛋白，其特征在于，利用VP64抗体用Western blot技术在蛋白质水平上鉴定得到权利要求4构建的转基因植株表达出的目的蛋白。

7.如权利要求6所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括来自单纯疱疹病毒的VP16蛋白和水稻转录因子Os11g01130。

8.权利要求1所述的水稻转录因子Os11g01130基因在调控水稻籽粒性状中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，其是将水稻转录因子Os11g01130基因的CDS序列通过Gateway系统构建到4个转录因子激活基序VP16的下游，转化水稻，从而改良转基因水稻籽粒的性状。

10.权利要求6或7所述的融合蛋白在调控水稻籽粒性状中的应用。