[发明专利]一种利用新型纳米硅材料固定化果胶酶的方法

权利要求书

1.一种利用新型纳米硅材料固定化果胶酶的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)纳米硅材料制备：4.0-5.0g F127，20-30g氯化钾，240-300ml去离子水，50ml盐酸，混合加入夹层烧杯中，15℃环境下搅拌均匀后，再加入TMB，搅拌3-4h后，加入逐滴滴加正硅酸乙酯20-30ml，搅拌20h，装釜。放入100-150℃烘箱，晶化，24h后取出。用酒精和去离子水洗涤，80-100℃烘干12h。放入马弗炉中煅烧。温度5℃/min上升到450-500℃，保持6h。冷却后，即得到纳米硅材料。

(2)纳米硅材料的活化：称取十二烷基磺酸钠0.6-0.8克，加二次蒸馏水100ml，加热溶解；称取处理过的纳米硅材料1.5-2.0克，加入到上述溶液中，超声处理10min，浸泡24h。倾去上层未吸附的十二烷基磺酸钠溶液，加1.0-2.0％壳聚糖溶液50-60ml，浸泡过夜。将纳米硅材料离心出来，加入2.5％戊二醛溶液20-30ml，交联4h后，水洗离心，置于真空干燥箱中，直至干燥呈粉末状。

(3)果胶酶在纳米硅材料上的组装：用去离子水配制2％的果胶酶溶液，离心，取上清液。将活化后的载体加入酶溶液中，调节pH至4.0-5.0，在25℃恒温振荡器中反应4h，离心分离，沉淀即为固定化果胶酶。

2.根据权利要求1所述的一种利用新型纳米硅材料固定化果胶酶的方法，其特征在于：步骤(1)所述的纳米硅材料制备原料由F127、氯化钾、盐酸、TMB、正硅酸乙酯组成。

3.根据权利要求1所述的一种利用新型纳米硅材料固定化果胶酶的方法，其特征在于：步骤(2)所述的纳米硅材料的活化原料由十二烷基磺酸钠、壳聚糖、戊二醛组成。