[发明专利]筛选或辅助筛选高抗穗发芽小麦的方法及其专用引物无效
申请号: | 201310106532.9 | 申请日: | 2013-03-29 |
公开(公告)号: | CN103160584A | 公开(公告)日: | 2013-06-19 |
发明(设计)人: | 陈新民;苗西磊;何中虎 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100081 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 筛选 辅助 高抗穗 发芽 小麦 方法 及其 专用 引物 | ||
1.筛选或辅助筛选高抗穗发芽小麦的专用引物,由如下引物对1和引物对2组成:所述引物对1由序列表中序列1所示的单链DNA分子和序列表中序列2所示的单链DNA分子组成;所述引物对2由序列表中序列3所示的单链DNA分子和序列表中序列4所示的单链DNA分子组成。
2.根据权利要求1所述的引物对,其特征在于:所述引物对1和所述引物对2独立包装;
所述筛选或辅助筛选高抗穗发芽小麦为从抗穗发芽亲本小麦和感穗发芽亲本小麦杂交的后代中筛选或辅助筛选高抗穗发芽小麦;
所述高抗穗发芽小麦为穗发芽率低于或等于抗穗发芽亲本。
3.含有权利要求1或2所述的专用引物的筛选或辅助筛选高抗穗发芽小麦的PCR试剂组。
4.根据权利要求3所述的PCR试剂组,其特征在于:所述PCR试剂组由PCR试剂1和PCR试剂2组成:
所述PCR试剂1由权利要求1或2所述的专用引物中的引物对1、PCR扩增缓冲液、dNTPs、DNA聚合酶和水组成;
所述PCR试剂2由权利要求1或2所述的专用引物中的引物对2、PCR扩增缓冲液、dNTPs、DNA聚合酶和水组成。
5.根据权利要求4所述的PCR试剂组,其特征在于:
所述引物对1中的每条引物在其对应所述PCR试剂1中的终浓度均为0.2μM;
所述引物2中的每条引物在其对应所述PCR试剂2中的终浓度均为0.2μM;
所述筛选或辅助筛选高抗穗发芽小麦为从抗穗发芽亲本小麦和感穗发芽亲本小麦杂交的后代中筛选或辅助筛选高抗穗发芽小麦;
所述高抗穗发芽小麦为穗发芽率低于或等于抗穗发芽亲本。
6.筛选或辅助筛选高抗穗发芽小麦的PCR扩增试剂盒,包括权利要求1或2所述的专用引物或权利要求3-5中任一所述的PCR试剂组;
所述筛选或辅助筛选高抗穗发芽小麦为从抗穗发芽亲本小麦和感穗发芽亲本小麦杂交的后代中筛选或辅助筛选高抗穗发芽小麦;
所述高抗穗发芽小麦为穗发芽率低于或等于抗穗发芽亲本。
7.权利要求1或2所述的专用引物、权利要求3-5中任一所述的PCR试剂组或权利要求6所述PCR扩增试剂盒在筛选或辅助筛选待测样本为高抗穗发芽小麦中的应用;
或权利要求1或2所述的专用引物、权利要求3-5中任一所述的PCR试剂组或权利要求6所述PCR扩增试剂盒在鉴定或辅助鉴定待测样本为高抗穗发芽小麦中的应用;
所述待测样本具体为抗穗发芽亲本小麦和感穗发芽亲本小麦杂交的后代或者亲本本身;所述高抗穗发芽小麦具体为穗发芽率低于或等于抗穗发芽亲本。
8.一种鉴定或辅助鉴定待测小麦是否为高抗穗发芽小麦的方法,包括如下步骤:分别用权利要求1或2所述的专用引物、权利要求3-5中任一所述的PCR试剂组或权利要求6所述PCR扩增试剂盒的引物对1和引物对2对待测小麦进行PCR扩增,检测扩增产物;
若所述引物对1的扩增产物中含有大小为159bp的产物,且所述引物对2的扩增产物中不含有大小为2150bp的产物,则待测小麦为或候选为高抗穗发芽小麦;
若为如下情况,则待测小麦不为或候选不为高抗穗发芽小麦:
1)所述引物对1的扩增产物中含有大小为159bp的产物,且所述引物对2的扩增产物中含有大小为2150bp的产物;
2)所述引物对1的扩增产物中不含有大小为159bp的产物,且所述引物对2的扩增产物中不含有大小为2150bp的产物;
3)所述引物对1的扩增产物中不含有大小为159bp的产物,且所述引物对2的扩增产物中含有大小为2150bp的产物。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于:
所述待测样本为抗穗发芽亲本小麦和感穗发芽亲本小麦杂交的后代或者亲本本身;
所述高抗穗发芽小麦为穗发芽率低于或等于抗穗发芽亲本;
所述PCR扩增的模板为待测小麦的基因组DNA。
10.小麦穗发芽抗性的数量性状基因位点,定位于2B染色体长臂上,位于SSR引物位点Xbarc1042和Xmag3319之间。
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