[发明专利]抗肿瘤三硫化合物及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及制药领域。更具体的说，本发明涉及抗肿瘤三硫化合物及其制备方法与应用。

背景技术

近年来，癌症发病率正在不断地上升，已成为严重危害人类健康的常见疾病，据统计，因病致死的人当中有21.75％死于癌症。根据美国癌症协会的一份“全球癌症现状及数据”报告，全球每天癌症死亡人数在20000左右。美国癌症协会预测，仅仅由于世界人口的增长及老龄化的加剧，到2050年，全球将会出现2700万新的癌症患者，同时死亡病例也将高达1750万。国内情况也基本如此，近20年间，恶性肿瘤在死亡中的构成比例已由12.6％升至17.9％，每年新发病人数约170万，有130余万人被癌症夺去生命。专家预计，2020年，死亡人数将超过400万。药物治疗是癌症的三大疗法之一，也是最主要的治疗手段，因此发现并研究具有高效、低毒的抗肿瘤药物至关重要。

在US4977138中公开了紫色杆菌(Chromobacterium sp.)能够发酵产生一种环肽类罗米地辛(romidepsin，FK228)。其结构中特有的二硫键是发挥活性的关键基团。由于稳定的疏水结构，romidepsin易透过肿瘤的细胞膜，在胞内其二硫键被谷胱甘肽还原成巯基发挥组蛋白脱乙酰基酶抑制剂(HDACI)的作用。2004年美国FDA批准romidepsin作为孤儿药，用于治疗皮肤T-细胞淋巴瘤(CTCL)，商品名为istodax。目前，环肽类HDAC抑制剂已经成为抗肿瘤药物开发的一个重点。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种三硫化合物。

本发明所提供的三硫化合物HS1123A，其结构如式I所示：

式I。

本发明的另一个目的是提供所述三硫化合物的制备方法。

本发明所提供的所述三硫化合物的制备方法，包括如下步骤：

在液体培养基中发酵紫色杆菌(Chromobacterium sp.)HS-13-94，得到发酵液；

从所述发酵液中分离和纯化得到所述三硫化合物。

本发明所述液体培养基由以下成分组成：葡萄糖、可溶性淀粉、胰蛋白胨、磷酸二氢钠、缬氨酸和水；以上成分在所述液体培养基中的浓度分别为：1升培养基中含10-40g葡萄糖、10-20g可溶性淀粉、15-20g胰蛋白胨、1-5g磷酸二氢钠和0.5-1g缬氨酸，调pH6.8-7.2。

本发明涉及的紫色杆菌(Chromobacterium sp.)HS-13-94已于2012年6月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保减号为CGMCC No.6247。

本发明所述分离和纯化的方法包括如下步骤：

(1).将所述发酵液离心后上清液或者发酵液直接进行以吸附树脂为吸附剂的吸附层析，用可溶解所述三硫化合物的溶液进行洗脱，得到含有上述三硫化合物的流份：

(2).将步骤(1)中得到的流份样品通过反相高效液相色谱法进行分离，即得到上述三硫化合物。

其中，在反相高效液相色谱法中使用充满了含18个碳原子的烯链的柱填料，并且使用的混合溶剂为乙腈的水溶液，甲醇的水溶液，或者甲醇和乙腈混合有机溶剂的水溶液进行洗脱。最后得到三硫化合物HS1123A。所述吸附树脂型号为SP850和HP20ss。所述反相高效液相色谱法中采用的色谱柱是Agilent ZORBAX-XDB反相色谱柱，流动相为甲醇水溶液，检测波长210nn。

本发明的又一个目的是提供一种用于制备抗肿瘤药物的化合物。采用CCK-8法测得三硫化合物HS1123A对人结直肠癌细胞HCT-116、人乳腺癌细胞MDA-MB231、人大细胞肺癌细胞NCI-H460具有非常强的抑制活性。

最后，本发明涉及治疗性组合物，该组合物由三硫化合物HS1123A以及一种或者多种常规载体和/或稀释剂组成。治疗的肿瘤包括直肠癌、乳腺癌或肺癌。