[发明专利]黄曲霉毒素的太赫兹波谱检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及微量有害物质物理检测的新方法，尤其涉及的是一种黄曲霉毒素的太赫兹波谱检测方法。

背景技术

黄曲霉素是食品安全检测中国家规定必检的一个项目，目前多采用生化的检测方法。这类检测方法都还存在着这样或那样的缺陷。如TLC方法虽然简便，但灵敏度差；HPLC虽然灵敏度高，但样品处理烦琐，操作复杂，仪器昂贵。ELISA重复性差试剂寿命短需要低温保存。在操作过程中，这类方法大多需要使用剧毒的真菌毒素作为标定标准物，有对操作人员造成巨大沾污的危险。在对样品进行预处理过程中，需要使用多种有毒、异味的有机溶剂，不仅毒害操作人员，而且污染环境。操作过程烦琐、时间长，劳动强度大。仪器设备复杂、笨重，难以实现现场快速分析。

发明内容

本发明是一种黄曲霉毒素的太赫兹波谱检测方法，它采用了物理的检测方法，用于解决在黄曲霉素检测过程中遇到的上述问题。它不仅可以检测出被检物是否含有黄曲霉素，而且可以辨别黄曲霉素的种类，在检测的精确度上，不亚于ELISA方法，而检测过程却大大简化，检测耗时大大缩短。

本发明的技术方案如下：

将怀疑有黄曲霉菌感染的粮食、食品和食用油作为待检对象，并制作待检物的样品。

利用黄曲霉毒素免疫亲和柱对待检物中含有的黄曲霉毒素进行提取。

提取的黄曲霉毒素保存在非极性、易挥发的有机溶剂(如甲醇、氯仿)中，并低温、密封保存。

检测时首先制作用于太赫兹波谱检测的样品。考虑到黄曲霉素检测浓度过低带来的不力影响，本技术方案采用了痕量检测方法。该方法的基本过程为：将含有黄曲霉素的溶剂滴到载玻片上，并涂抹均匀，然后让有机溶剂挥发，有机容易挥发完后就会在载玻片上留下一层黄曲霉毒素的薄层，考虑到薄层不均匀或过薄影响检测效果，可多滴几次，并使溶剂完全挥发，以增加薄层厚度，增强检测效果。

载有黄曲霉毒素薄层的载玻片放在太赫兹时域波谱检测系统(THz-TDS)上采用透射法进行波谱测量，得到黄曲霉毒素的波谱。

采用上述方法先获取各种已知黄曲霉毒素波谱，并作为知识存储到一个专家系统中。

通过1-5步得到的待检样品的波谱，与存储在专家系统中的波谱进行比对或匹配，以判断是否有黄曲霉素和黄曲霉毒素的类型。

将黄曲霉毒素的检测结果在计算机上输出，形成并打印检测报告。

有益效果：

1.利用本技术发明对黄曲霉毒素进行检测，突出的优势是检测速度快。因为样品对太赫兹波的响应非常快，在纳秒量级，检测系统采集这种响应并采用计算机进行分析计算也在秒量级上。一般检测时为了提高准确性，需要进行多次检测(一般为三次)，并将检测结果取平均值，加上人工分析、给出结论的时间，一般不超过半个小时。而一般的生化检测的检测时间，多在数天至数小时时间不等，本技术发明大大缩短了检测时间。

2.本技术发明采用计算机技术进行分析判断，具有比一般生化的检测方法更高的智能性。生化检测大多最后的判断还是需要人工的方法，智能化程度不高，而且受到检测人员经验的限制，往往会出现判断失误的情况。本技术发明通过计算机对采集的太赫兹波谱进行智能分析和识别，最大限度规避了人工判断带来的风险，具有很高的可靠性。

3.本技术发明用于检测黄曲霉毒素检测过程简单，操作简便，无专业技术人员稍加培训即可完成检测工作，劳动强度大大降低，检测效率大大提高。而传统的生化检测方法，动用仪器和试剂多，检测人员技术水平要求高，检测程序复杂，非专业检测人员不能掌握，本技术发明很好地克服了以上缺点。

附图说明

图1为黄曲霉毒素B1浓度分别为1ppm，3ppm和5ppm时的太赫兹时域谱(溶剂为乙腈)；

图2为黄曲霉毒素B1浓度分别为10ppm，30ppm和50ppm时的太赫兹时域谱(溶剂为乙腈)；

图3为各种浓度下的黄曲霉毒素B1的太赫兹频域谱(溶剂为乙腈)；

具体实施方式

以下结合具体实施例，对本发明进行详细说明。

本发明黄曲霉毒素的太赫兹波谱检测方法的具体实施方案如下：

1.均质样品

将固体样品(如花生、大豆、小麦等)去除杂质，用水浸泡，待样品松软后，取出样品放入搅拌器中搅拌1-2分钟，使之高速均质。对于粉状样品，可加水置于锥形瓶中，在摇床上震动30分钟进行均质。

2.粗滤与稀释

将均质液通过槽纹滤纸过滤，准确移取15ml滤液并加入30ml水进行稀释。

3.样品过柱