[发明专利]修饰植物中的糖蛋白产生

权利要求书

1.用于合成具有减少的岩藻糖基化和木糖基化之目的蛋白质的方法，其包括：在植物、植物部分或植物细胞中引入核苷酸序列，所述核苷酸序列编码第一核苷酸序列和第二核苷酸序列，所述第一核苷酸序列编码β-1,4半乳糖基转移酶（GalT），所述第一核苷酸序列与在所述植物中有活性的第一调节区有效连接，所述第二核苷酸序列编码所述目的蛋白质，所述第二核苷酸序列与在所述植物中有活性的第二调节区有效连接；瞬时共表达所述第一和第二核苷酸序列，从而合成目的蛋白质，其包含具有减少的岩藻糖基化、木糖基化。

2.权利要求1的方法，其中所述第一核酸序列包含SEQ ID NO:14(GalT)或与SEQ ID NO:14约80%到100%相似的序列。

3.权利要求1的方法，其中所述第一核酸序列包含SEQ ID NO:14的370-1194位核苷酸，或者包含与SEQ ID NO:14的370-1194位核苷酸约80%到100%相似的序列。

4.权利要求1的方法，其中所述第一调节区是第一质体蓝素启动子或第一35S启动子，其中所述第二调节区是第二质体蓝素启动子或第二35S启动子。

5.权利要求1的方法，其中在所述植物中表达第三核苷酸序列，所述第三核苷酸序列编码沉默抑制基因，所述第三核苷酸序列与在所述植物中有活性的第三调节区有效连接。

6.权利要求5的方法，其中所述目的蛋白质以高至1.5g/kg植物鲜重的量合成。

7.权利要求5的方法，其中所述第三调节区是质体蓝素启动子或35S启动子。

8.权利要求4的方法，其中在所述植物中表达第三核苷酸序列，所述第三核苷酸序列编码沉默抑制基因，所述第三核苷酸序列与在所述植物中有活性的第三调节区有效连接。

9.权利要求8的方法，其中所述第三调节区是第三质体蓝素启动子或第三35S启动子。

10.权利要求1的方法，其中所述目的蛋白质是抗体、抗原或疫苗。

11.权利要求10的方法，其中编码目的蛋白质的第二核苷酸序列包含与在所述植物中有活性的调节区2A有效连接的核苷酸序列2A，和与在所述植物中有活性的调节区2B有效连接的核苷酸序列2B，并且2A和2B各自编码的产物相组合而产生抗体。

12.权利要求11的方法，其中所述调节区2A是质体蓝素启动子，所述调节区2B是质体蓝素启动子。

13.包含第一核酸序列的核酸，所述第一核酸序列包含SEQ ID NO:14(GalT)，其中所述第一核酸序列编码修饰目的蛋白质之糖基化的蛋白质，所述第一核酸序列与包含质体蓝素启动子的第二核酸序列有效连接。

14.包含权利要求13所述核苷酸序列的植物细胞。

15.权利要求1的方法，其中所述目的蛋白质是抗体，并以高至1.5g/kg叶鲜重的量合成。

16.权利要求1的方法，其中所合成的目的蛋白质缺乏岩藻糖基化、木糖基化或二者皆缺乏。

17.权利要求1的方法，其中所述目的蛋白质与在野生型植物中产生的相同目的蛋白质相比，包含少于10%的岩藻糖基化和木糖基化。

18.权利要求1的方法，其中所合成的目的蛋白质与在野生型植物中产生的相同目的蛋白质相比，包含少于5%的岩藻糖基化和木糖基化。

19.权利要求1的方法，其中所合成的目的蛋白质与在野生型植物中产生的相同目的蛋白质相比，包含少于2%的岩藻糖基化和木糖基化。