[发明专利]一种快中子辐照结合组织培养的花生育种方法

权利要求书

1.一种快中子辐照结合组织培养的花生育种方法，其特征在于它包括如下步骤：

(1) 挑选饱满成熟的花生种子进行快中子辐照处理，辐照的剂量为9.7Gy~18.0Gy；

(2) 将辐照处理后的种子去子叶，取种胚进行表面消毒; 

(3) 在无菌条件下分离所述种胚的胚小叶为外植体，接种到添加12～15mg/L 2,4-D的体胚诱导培养基上进行培养，诱导体胚形成； 

(4) 将形成体胚的外植体转移至添加4~8mg/L TDZ的 体胚萌发培养基上培养，诱导体胚萌发； 

(5) 将萌发的体胚转移到MS培养基上培养，促使萌发的体胚长成再生苗；

(6) 当再生苗生长至1.5～2.5cm时，从基部切下，嫁接于无菌萌发的花生实生苗的下胚轴上，经无菌培养后移栽于育苗基质中驯化培养，后移栽到田间。

2.根据权利要求1所述的快中子辐照结合组织培养的花生育种方法，其特征在于：随辐照剂量的增加胚小叶外植体再生植株的频率呈下降趋势。

3.根据权利要求1所述的快中子辐照结合组织培养的花生育种方法，其特征在于：所述步骤(2)中花生种胚的表面消毒采用70%的酒精浸泡10～20秒，再用2%的次氯酸钠浸泡5～8分钟，最后用无菌蒸馏水冲洗2~3遍。

4.根据权利要求1所述的快中子辐照结合组织培养的花生育种方法，其特征在于：将所述步骤(3)中的体胚诱导培养基、步骤(4)中的体胚萌发培养基和步骤(5)中成苗培养基的pH调至5.8，培养条件均为：温度为26～28℃、光照强度为2000～2500Lx、每日光照为12～15h。

5.根据权利要求1或4所述的快中子辐照结合组织培养的花生育种方法，其特征在于：所述体胚诱导培养基为MS基本培养基+12 mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+8g/L琼脂。

6.根据权利要求1或4所述的快中子辐照结合组织培养的花生育种方法，其特征在于：所述体胚萌发培养基为MS基本培养基 +6 mg/L TDZ +30g/L蔗糖+8g/L琼脂。

7.根据权利要求1或4所述的快中子辐照结合组织培养的花生育种方法，其特征在于：所述成苗培养基为MS基本培养基 +30g/L蔗糖+8g/L琼脂。