[发明专利]MTA1来源的抗肿瘤CTL表位肽及其应用

说明书

本发明是专利申请是专利申请号：201110138635.4 ，申请日：2011年05月26日，发明名称为《MTA1来源的抗肿瘤CTL表位肽及其应用》的分案申请。

技术领域

本发明涉及肽，尤其是涉及MTA1来源的抗肿瘤CTL表位肽，本发明还涉及该肽在制备肿瘤治疗性多肽疫苗中的应用。

背景技术

转移是一个涉及多种原因及其产物的复杂过程，包括肿瘤细胞从原发灶脱离，侵入淋巴管、血管及周围组织，诱导血管形成，逃避宿主细胞抗肿瘤反应和在转移部位生长。因此，了解肿瘤转移所涉及的基因和基因产物是目前国内外研究的热题。

转移相关蛋白1（MTA1）是1994年Toh等人在人的乳腺癌细胞中鉴定发现的。近年来的研究发现它在多种转移性肿瘤中过表达，如乳腺癌、胃肠癌、食管癌、胰腺癌、胃癌、肝癌、非小细胞肺癌等，而在正常组织中低表达或不表达，并且其在肿瘤组织中的表达水平与其转移或浸润潜能有明显的关系。这些研究结果表明MTA1是一个非常好的肿瘤相关抗原，是肿瘤诊断和治疗的靶点。近年来大多数研究者将目光集中在MTA家族成员尤其是MTA1在多种人类肿瘤组织及肿瘤细胞中的表达情况、分子功能等方面，Li Kai等人在MTA1的抗前列腺癌血管生成方面取得了一定的研究成果。目前尚未见针对MTA1的HLA-I类限制性CTL表位肽的报道。

随着现代免疫学的发展，细胞毒性T淋巴细胞（Cytotoxic T lymphocyte，CTL）在肿瘤中发挥的重要作用越来越受到重视。如何有效激发CTL介导的特异性细胞免疫应答，发挥抗肿瘤效能，已经成为当今肿瘤治疗性多肽疫苗研制领域的一个重要课题。既往研究发现，引起CTL免疫应答反应的，并非完整的肿瘤抗原分子，而是抗原来源的特异性CTL表位（Epitope）。抗原递呈细胞摄取肿瘤抗原后，通过蛋白水解作用将其加工成为8～10个氨基酸长度的多肽片段，即CTL表位，进而与内质网腔中的主要组织相容性复合体I（MHC-I）类分子结合形成多肽-MHC复合物（peptide-MHC complex，pMHC），并最终将pMHC递呈到细胞表面供CD8+T细胞表面的T细胞受体（T cell receptor，TCR）识别，从而活化CTL细胞，引发CTL免疫应答。

发明内容

本发明的目的在于提供一种对肿瘤细胞SW620具有一定杀伤力的MTA1来源的抗肿瘤CTL表位肽，同时本发明还提供了该肽在制备肿瘤治疗性多肽疫苗中的应用。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的MTA1来源的抗肿瘤CTL表位肽，包括九肽，所述九肽的氨基酸序列为

P22：Tyr-Leu-Ile-Arg-Arg-Ile-Glu-Glu-Leu  分子量为1204.49。

    本发明还包括上述肽在制备高表达该抗原的肿瘤治疗性多肽疫苗的应用。

本发明的优点在于采用理论和实验相结合的方法初步鉴定出肿瘤转移相关抗原的表位肽。鉴定的九肽未见文献报道，为研制基于抗原MTA1的肿瘤治疗性多肽疫苗提供理论基础，并为后续多价的抗原肽疫苗、长肽疫苗、多表位疫苗等的构建奠定基础。

附图说明

图1-5是本发明表位肽的质谱分析图。

图6是本发明表位肽诱导的特异性CTL对肿瘤细胞SW620 （MTA1-阳性，HLA-A2阳性）的杀伤作用。

图7-11是本发明表位肽诱导的特异性CTL分泌IFN-γ的能力。

具体实施方式

本发明所述的MTA1来源的抗肿瘤CTL表位肽，包括九肽，所述九肽的氨基酸序列为

P22：Tyr-Leu-Ile-Arg-Arg-Ile-Glu-Glu-Leu

或 P57：Ala-Leu-Ala-Asp-Lys-His-Ala-Thr-Leu

或 P109：Phe-Leu-Ser-Arg-Gln-Leu-Glu-Ser-Leu

或 P129：Thr-Leu-Leu-Asn-Glu-Thr-Glu-Ser-Leu

或 P173：Tyr-Gln-Ala-Asp-Ile-Thr-Asp-Leu-Leu。

本发明主要采用理论与实践相结合的方法，根据抗原的一级结构，采用免疫信息学手段,运用SYFPEITHI、BIMAS、NetCTL 1.2和IEDB数据库对MTA1蛋白抗原的HLA-A*0201限制性CTL表位进行了预测分析。