[发明专利]人工合成甘蓝型油菜的简捷方法

说明书

技术领域

本发明涉及作物遗传育种领域，特别是一种人工合成甘蓝型油菜的简捷方法。

背景技术

人工合成甘蓝型油菜是拓宽油菜遗传育种种质资源的有效途径,也是研究芸薹属物种起源与演化重要的手段之一。在合成甘蓝型油菜的过程中，由于甘蓝（CC=20）与白菜（AA=18）种间杂交的不亲和性以及染色体数目不相同，杂合子、杂合子胚很难发育成正常的胚；即使获得了杂种F1（AC=19）的种子也是不可育的，需要通过染色体加倍才能获得可育的异源四倍体的甘蓝型油菜（AACC=38）。目前，为了得到人工合成甘蓝型油菜，经常采取以下方法：1）直接大规模杂交法，在甘蓝与白菜中，以一个作父本，去雄的另一个作母本，一次杂交1000朵花以上，以期得到种间杂种甘蓝型油菜，这种方法获得种间杂种的概率非常低；2）重复授粉法，或称蒙导法，以白菜为父本，甘蓝为母本为例，先后授粉两次, 先在甘蓝的花柱头上授以自身的花粉, 约隔五小时以后再授以白菜的花粉, 用这种方法曾经得到过种间杂种；3）子房或胚培养的拯救法, 授粉后15天左右，取子房或胚进行培养，再将单倍体杂种小苗在含0.01%秋水仙碱的MS培养基中预培养处理10天左右，进行染色体加倍，最终得到人工合成的甘蓝型油菜。

通过这些方法，尽管获得了一些人工合成甘蓝型油菜，但是目前获得人工合成甘蓝型油菜的方法都存在如下问题：工作量大，耗时长，复杂，效率低。为丰富世界主要油料作物甘蓝型油菜的遗传基础，为获得更高的甘蓝型油菜杂种优势利用打下良好基础，迫切需要开发一种能操作简单，工作量小，效率高的获得人工合成甘蓝型油菜的新方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对现有技术中甘蓝与白菜种间杂交的不亲和性及工作量大，耗时长，复杂，效率低的问题，提供一种操作简单，工作量小，效率高的人工合成甘蓝型油菜的简捷方法。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：一种人工合成甘蓝型油菜的简捷方法，其是在将甘蓝与白菜杂交时，于母本的柱头授粉后16小时-144小时之间，直接对幼嫩的子房喷施质量百分比浓度为0.05%-0.15%的秋水仙素水溶液，待子房发育成自然成熟的角果后，收获角果中饱满的种子，即得。

上述方案的一优选实施方式为，在授粉后16小时直接对幼嫩的子房喷施质量百分比浓度为0.15%秋水仙素水溶液1次。

上述方案的一优选实施方式为，在授粉后24小时直接对幼嫩的子房喷施质量百分比浓度为0.1%秋水仙素水溶液1次，之后每隔24小时喷施1次，共喷施6次。

上述方案的一优选实施方式为，在授粉24小时和48小时两个时间点直接对幼嫩的子房分别喷施质量百分比浓度为0.05%和0.1%的秋水仙素水溶液。

上述方案所述母本为甘蓝或白菜。

本文中提到的白菜为白菜型油菜。

与现有技术相比，本发明所具有的有益效果为：本发明在甘蓝与白菜杂交授粉后的适当时间内对授粉后的幼嫩子房直接喷施秋水仙素水溶液，这样不仅克服了现有技术中存在的甘蓝与白菜种间杂交的不亲和性及工作量大，耗时长，复杂，效率低的问题，而且本发明用于人工合成甘蓝型油菜，操作简单，工作量小，效率高。

附图说明

图1为甘蓝G3×白菜B1获得的人工合成甘蓝型油菜的PCR检测图。

图2为甘蓝G2×白菜B2-2获得的人工合成甘蓝型油菜的PCR检测图。

图3为甘蓝G4×白菜B1获得的人工合成甘蓝型油菜的PCR检测图。

具体实施方式

实施例1：利用甘蓝G3品系与白菜B1品系人工合成甘蓝型油菜

1. 材料种植：2010年10月10日，将甘蓝G3品系与白菜B1品系种植到油菜试验田中，2011年3月10日，白菜B1进入开花期， 3月23日甘蓝G3进入开花期。

2. 杂交：以开花早的白菜B1为父本，开花相对较晚的甘蓝G3为母本。上午9-10点之间，在甘蓝G3的花序上，选取花瓣将要展开但又没有开的花蕾11朵，其它开过和没开的花蕾全部去掉；然后彻底去掉11朵花的雄蕊，将白菜B1的花粉授到甘蓝G3的柱头上，用硫酸纸袋袋子套袋，以防其它来源的花粉落到柱头上。

3. 秋水仙素处理：授粉16小时之后，去掉袋子，对11朵花的幼嫩子房喷施质量百分比浓度为0.15%的秋水仙素水溶液。之后等子房发育成自然成熟的角果后收种子，其中有干瘪的种子和饱满的种子。