[发明专利]一种罗汉果杂交育种技术

说明书

技术领域

本发明涉及一种用六倍体与二倍体罗汉果杂交，培育优良高产高抗四倍体罗汉果品种的技术方法。

背景技术

罗汉果是一种名贵药材。中医药学认为，罗汉果甘、酸，性凉，有清热凉血、生津止咳、滑肠排毒、嫩肤益颜、润肺化痰等功效。特别适宜.经常吸烟、饮酒者、容易上火、肺部功能者饮用。.还是逢年过节，馈赠友人的上佳保健品。罗汉果作为广西特产，已经大面积种植，具有较高的经济价值。罗汉果有青皮、垃江、长滩、红毛、冬瓜、茶山6个品种。由于产量较高、适应性强等优点，青皮果种植面积已经高达90%以上。

常规的杂交育种，可以把分散于不同亲本上的优良性状组合到杂种，获得具有高产高抗逆性等优点的新品种。我们利用多倍体材料与常规的杂交育种手段相结合，人工得到了高产高抗的异源多倍体材料。

根据文献报道（闫海锋，2011）：以罗汉果二倍体为对照,研究二倍体与三倍体、四倍体植株之间的生物学性状时，发现罗汉果植株的地茎、叶面积、叶厚、气孔长宽、子房纵径、子房横径等均表现出：四倍体大于 三倍体大于二倍体,而且多数性状在不同倍性间的差异均达到显著水平。在对小麦的研究中也发现：四倍体优于二倍体，六倍体又优于四倍体。

秋水仙素的应用使得多倍体育种成为可能，通过人工诱导多倍体成为现代育种工作的一个重要手段。人工诱导多倍体罗汉果可大幅提高根、茎、叶、果实等部位产量,增强抗性,提高活性成分含量,其中三倍体罗汉果还具有无籽的特性,提高整果利用率和甜苷提取得率。很多科研单位都在努力寻找更好的三倍体株系。虽然三倍体罗汉果的可育性低是一个非常难得的优良性状，可以获得无籽或少籽的品种，但无籽罗汉果品种果实较小这一缺点，尚未得到解决，使得该类品种难应用于生产。

用秋水仙素诱导的同源四倍体植株与二倍体相比，部分器官出现巨大性，但也出现了生长缓慢，分枝少，生育期延迟等缺点。异源多倍体相比较同源多倍体，不但具有同源多倍体具有的所有优点，同时异源多倍体的等位基因杂合性，丰富了它们的遗传背景，从而提高了它们的遗传适应性。但自然加倍的多倍体材料非常难得。

本发明用六倍体与野外采集的二倍体罗汉果杂交，得到了新的的异源四倍体，是一个具有优良农艺性状的新品种。用杂交的方法得到的异源四倍体，与常规的秋水仙素诱导的同源四倍体相比，除了具有植物多倍体的主要特征“巨大性”外，还整合了父本中的优良基因。由于多倍体植物的新陈代谢旺盛，但生长缓慢，最终导致更多的有机物积累，使得植物，特别是药用植物的有效成分积累。我们用从野外采集的野生材料作为杂交父本，使我们的杂交后代除了高产性外，还具有更强的抗逆性。

发明内容

本发明提供了一种六倍体罗汉果材料。

所述六倍体罗汉果材料是在用秋水仙素对罗汉果雌株进行染色体加倍的实验中获得的。在实验中，发明人发现，除了理论中的罗汉果二倍体和四倍体外，还出现了一部分非正常加倍的五倍体和六倍体。对其中一个五倍体材料Z-167进行倍性的流式细胞分析的结果如图1所示，对其中一个六倍体材料Z-123进行倍性的流式细胞分析的结果如图2所示（如图1、图2所示）。由于六倍体材料在实际生产应用中的巨大价值，发明人通过大量的筛选染色体加倍诱导后的批量材料，并结合流式细胞仪对所述材料的倍性进行了多次检测，获得了几个稳定的六倍体株系。

通过检测上述六倍体株系的一系列指标，发现六倍体材料相比较常规的二倍体材料，具有茎蔓粗壮、叶片厚实、叶色深绿等优点，但也有生长缓慢、上棚较晚、分支较少等缺点。所以在本发明中用六倍体材料与二倍体材料杂交，杂交得到的后代，能够克服以上缺点，使得到的新品种不但具有多倍体果大、甜甙含量高等优点，还能使整个植株的生长水平趋于正常栽培品种。

本发明还提供了一种新的杂交育种技术，所述杂交育种技术以六倍体罗汉果雌株为母本，以二倍体罗汉果雄株为父本进行杂交，获得四倍体的罗汉果。更具体的，本发明用上述获得的罗汉果六倍体雌株与野外采集的二倍体罗汉果雄株杂交，得到了新的异源四倍体材料，所述异源四倍体材料是一个具有优良农艺性状的新品种。