[发明专利]HMG粗品的制备方法有效
申请号: | 201310120897.7 | 申请日: | 2013-04-09 |
公开(公告)号: | CN103159846A | 公开(公告)日: | 2013-06-19 |
发明(设计)人: | 刘爱红;陈方山 | 申请(专利权)人: | 邹平县滨渤生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/575 | 分类号: | C07K14/575 |
代理公司: | 济南舜源专利事务所有限公司 37205 | 代理人: | 徐槐 |
地址: | 256200 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | hmg 制备 方法 | ||
1.HMG粗品的制备方法,包括下述的步骤:
a.收集绝经期妇女尿液,采用40目滤网过滤,用乙酸调pH值到3.8-4.0,静置3-5小时后除去沉淀;
b.在步骤a中除去沉淀后的尿液中加入硅胶,所述的硅胶的加入量为尿液重的0.6-1.5%,搅拌1.5-3小时,静置0.5-1.5小时;
c.取上清液,干燥沉淀;
d.将沉淀置于洗脱柱中,用40-60%的丙酮和1/20-1/10mol的无水乙酸钠洗脱;
e.在洗脱液中加入丙酮,至丙酮的浓度达到65-80%之间,在4-10℃的温度区间静置6-10小时;
f.取出上清液,回收,将沉淀用无水乙醇洗涤,真空干燥,得HMG的粗品。
2.如权利要求1所述的HMG粗品的制备方法,其特征在于,所述的步骤d中,洗脱的条件为:洗脱柱高1米,上样60cm,每吨尿液的洗脱柱粗横截面为0.042m2,洗脱时间为1.5-2.5小时,洗脱完毕,每吨尿液每小时流洗脱液9-11L。
3.如权利要求1所述的HMG粗品的制备方法,其特征在于,所述的步骤d中,洗脱的条件为:洗脱柱高1米,上样60cm,每吨尿液的洗脱柱粗横截面为0.042m2,洗脱时间为2小时,洗脱完毕,每吨尿液每小时流洗脱液10L。
4.如权利要求1所述的HMG粗品的制备方法,其特征在于,所述的步骤e中,在洗脱液加入丙酮至丙酮的浓度达到70%,在4-10℃的温度区间静置8小时。
5.如权利要求1所述的HMG粗品的制备方法,其特征在于,所述的步骤a中,所述的绝经期妇女尿液中,不得检出艾滋病毒、乙肝病毒HBs-Ab、HBc-Ab、Hbe-Ab。
6.如权利要求1所述的HMG粗品的制备方法,其特征在于,所述的步骤a中,所述的成品HMG粗品中不得检出艾滋病毒、乙肝病毒HBs-Ab、HBc-Ab、Hbe-Ab。
7.如权利要求1所述的HMG粗品的制备方法,其特征在于,所述的步骤b中采用的硅胶为经处理的硅胶,其处理步骤是:将硅胶用纯净水洗至pH 7,然后置于6mol/L盐酸内浸泡2小时,最后再用纯净水将硅胶洗至pH值4-6。
8.如权利要求1所述的HMG粗品的制备方法,包括下述的步骤:
a.收集绝经期妇女尿液,采用40目滤网过滤,用乙酸调pH值到3.9,静置4小时后除去沉淀;
b.在步骤a中除去沉淀后的尿液中加入硅胶,所述的硅胶的加入量为尿液重的1%,搅拌2小时,静置1小时,硅胶为经处理的硅胶,其处理步骤是:将硅胶用纯净水洗至pH 7,然后置于6mol/L盐酸内浸泡2小时,最后再用纯净水将硅胶洗至pH值4-6;
c.取上清液,干燥沉淀;
d.将沉淀置于洗脱柱中,用50%的丙酮和1/15mol的无水乙酸钠洗脱;
e.在洗脱液中加入丙酮,至丙酮的浓度达到70%之间,在4℃下静置8小时;
f.取出上清液,回收,将沉淀用无水乙醇洗涤,真空干燥,得HMG的粗品。
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