[发明专利]一种寡养单胞菌及其在降解啶虫脒中的应用有效
申请号: | 201310121725.1 | 申请日: | 2013-04-09 |
公开(公告)号: | CN103571769A | 公开(公告)日: | 2014-02-12 |
发明(设计)人: | 许平;唐鸿志;胡海洋;李健;陶飞 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A62D3/02;C12R1/01;A62D101/04;A62D101/26 |
代理公司: | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人: | 郑立 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 寡养单胞菌 及其 降解 啶虫脒 中的 应用 | ||
技术领域
本发明涉及一种寡养单胞菌,尤其涉及一种能降解啶虫脒的寡养单胞菌。
背景技术
啶虫脒(Acetamiprid)属于氯化烟酰亚胺类新型高效杀虫剂,于1996年由日本曹达株式会社开发并商品化,是继吡虫啉、烯啶虫胺之后的第三个新烟碱类杀虫剂。啶虫脒是一种新型甲基乙酰胺类杀虫剂,具有触杀、胃毒、渗透和内吸等杀虫作用,高效、安全、广谱,对半翅目、鳞翅目、鞘翅目等有效,具有活性高、持效期长、用量少、内吸性强等优点。啶虫脒作为一种神经性杀虫剂,是烟酸乙酰胆碱酯酶受体的作用体,能选择性抑制昆虫神经系统中乙酰胆碱酯酶的受体,表现出与这一受体的极高竞争性结合能力,可抑制烟酸乙酰胆碱的传递,干扰害虫的神经系统化学信号的传递,破坏昆虫中枢神经的正常传导,从而导致昆虫麻痹并最终死亡。
随着对该杀虫剂研究的不断展开,该杀虫剂的毒性日益显现。Hassani等在其研究中指出,啶虫脒低浓度下会影响蜜蜂对刺激的灵敏度以及损伤蜜蜂的长期记忆。Kocaman等报道指出,体外实验中啶虫脒显示出了对人体外周血淋巴细胞的基因毒性以及细胞毒性:25-40μg/ml浓度的啶虫脒处理24及48小时,会显著诱发人体外周血淋巴细胞的姐妹染色单体交换以及染色体畸变,同时使用30-40μg/ml啶虫脒会显著诱导细胞微核的产生,表明了啶虫脒会诱发DNA损伤。因而有必要研究该杀虫剂高效降解和转化方法,减少其在环境中残留,降低对益虫及人类危害的目的。
微生物转化是利用微生物代谢过程中产生的酶系对底物的某一特定部位进行有机反应,在微生物体内或体外促进天然的和人工合成的化学分子的诸多转化反应,反应条件温和、专一性强、高效环保。由于微生物种类繁多、繁殖速度快、代谢能力强等优点,可以考虑使用微生物转化技术降低农残中啶虫脒的含量,并转化获得高值新型农药,减少对益虫及人类的潜在危害。
发明内容
本发明的目的是提供一种能高效降解啶虫脒的寡养单胞菌及其在降解啶虫脒中的应用,所述寡养单胞菌能将有毒的啶虫脒降解为无毒的化合物,保护了环境,且使用方法简单、经济、无二次污染。
为实现上述目的,本发明采用以下技术方案:
一种寡养单胞菌,菌名为寡养单胞菌(Stenotrophomonas sp.)XP,已于2010年12月31日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC),其保藏登记号为CCTCC NO:M2010375。中国典型培养物保藏中心地址:中国,武汉,武汉大学;邮编:430072。
所述寡养单胞菌(Stenotrophomonas sp.)XP,来源于生产啶虫脒农药厂的上壤样品、排污口水样,经富集培养、分离得到。
所述寡养单胞菌(Stenotrophomonas sp.)XP,菌落成半透明乳白色或乳白色,菌落湿润、边缘整齐,多为规则圆形菌落,该菌为一株革兰氏阴性菌,具有极生鞭毛,菌体为短杆状,长约为1μm,宽约为0.5μm,结果见图1。使用16S rDNA基因序列分析,结果显示该菌与假单胞菌属(Pseudomonas sp.)及寡养单胞菌属(Stenotrophomonas sp.)细菌相似性最高,同时进化树分析结果指出,该菌与寡养单胞菌(Stenotrophomonas sp.)进化距离更进,结果见图2。之后针对假单胞菌与寡养单胞菌氧化酶反应实验的不同设计实验,结果指出,该菌为氧化酶反应阴性,与寡养单胞菌(Stenotrophomonas sp.)反应结果一致。
本发明所述的高效降解啶虫脒寡养单胞菌(Stenotrophomonas sp.)XP,在添加1g/L酵母粉的无机盐培养基中,菌体初始浓度OD600nm为0.04,能够在26小时的培养过程中将1g/L啶虫脒降解完全,结果见图3。
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