[发明专利]单分离胚胎的方法

说明书

本申请是2010年9月27日提交的申请号为201010299388.1的专利申请的分案申请。

技术领域

本发明提供一种单分离（singulating embryos）胚胎的方法。

背景技术

植物的无性繁殖对于有些物种而言已表明产生大量的基因相同的胚胎，所述胚胎每个都具有长成正常植物的能力。这样的胚胎通常必须在实验室条件下进一步培养，直到它们达到自养“苗”状态为止，自养“苗”状态的特征在于经由光合作用产生它们自己的食物、抵抗干旱、产生能够穿透土壤的根、和抵御土壤微生物的能力。有些研究人员已用生产出的被称为人造种子的人工种子作试验，在人工种子中将单个植物体细胞或合子胚封装在种皮中。在授予Carlson等的美国专利No.5,701,699中公开了这样的人造种子的例子，该美国专利的公开内容在此以参考的方式明确并入。

典型的人造种子包括种壳、合成配子体和植物胚胎。不包括植物胚胎的人造种子在本领域被称为“种子坯（seed blank）”。这样的种子坯通常为具有封闭端和开口端的圆柱形囊。将合成配子体放置在种壳内，以基本上充满种壳的内部。通常被称为子叶约束物(cotyledon restraint)的纵向延伸的多孔硬插入物可被设置在合成配子体内的中心，并包括部分延伸通过子叶约束物长度的位于中央的空腔。空腔具有在其中接纳植物胚胎的尺寸。公知的植物胚胎包括胚根端和子叶端。首先将植物胚胎淀积在子叶约束物的子叶端的空腔内，并通过至少一个端密封将该植物胚胎密封在种子坯内。在端密封中存在薄弱点，以允许胚胎的胚根端穿透端密封。

已经存在可用于大量生产上述类型的人造种子的自动化方法。在名称为“System and Method of Embryo Delivery for Manufactured Seeds”、并转让给华盛顿的Weyerhaeuser Company of Federal Way的美国专利申请No.10/982,951中描述了一种这样的自动化方法，该美国专利申请的公开内容在此以参考的方式明确并入。

当前，从生长介质手工采集胚胎，并将胚胎物理放置在板上，以便回收并插入种子坯中。尽管这样的手工过程是有效的，但它们不是没有它们的局限性。作为非限制性示例，这样的手工操作是耗时耗力的，并因此昂贵。作为生产大量可用于插入人造种子中的体细胞胚的过程的一部分，需要使该过程的手工劳动成分最小化。

发明内容

提供本发明内容以便以简单的方式介绍将在以下的具体实施方式中详细说明的概念的选择。本发明内容不打算确定要求保护的主题的关键特征，也不打算在确定要求保护的主题的范围中用作帮助。

提供了一种单分离（singulating embryos）胚胎的方法。该方法包括在系统内提供多个胚胎和在流体中感测多个胚胎中的至少一个胚胎。该方法还包括在表面上分配多个胚胎中的至少一个胚胎。

附图说明

当结合附图时，本发明的上述方面及许多附带的优点将通过参考以下的详细说明而变得更好地理解，其中：

图1是根据本发明的一个实施例，利用单分离胚胎的方法的系统的一个示例的示意图；

图2A是根据本发明的一个实施例，单分离胚胎的方法的流程图；

图2B是图2A的流程图的继续；

图3A是根据本发明的另一实施例，单分离胚胎的方法的流程图；以及

图3B是图3A的流程图的继续。

具体实施方式

图1示意性地描绘了根据本发明的一个实施例，用于实现单分离胚胎的方法的自动化系统20。系统20与用于装配人造种子的组件（assembly）(未示出)联合的方式适当地安装，或者与这样的组件距离较远。

系统20包括胚胎储存组件22、可编程逻辑控制器(PLC)24、放置机构26、和胚胎淀积组件28。胚胎储存组件22包括单分离容器30、升降机机构32、和传感器34。单分离容器30合适地为具有多个胚胎40悬浮在诸如无菌超纯水的流体中的容器。优选地，将流体搅动至足以悬浮所有胚胎40的程度。单分离容器30安装在升降机机构32上。

升降机机构32包括基板50，基板50与诸如螺旋驱动或剪刀式升降机的公知的升降机52连接，以帮助维持单分离容器30的出口处基本上恒定的压头（head）。在本公开的含义和本文中使用的范围内，术语“基本上”意在包括产生几乎恒定的流体流率的工程允许偏差。