[发明专利]酵母浓度的流式细胞术检测方法

权利要求书

1.一种酵母浓度的流式细胞术检测方法，其特征在于其包括以下步骤：

1）测定流式细胞仪的上样速度；

2）制备酵母悬液；

3）利用流式细胞仪测定酵母浓度。

2.根据权利要求1所述的酵母浓度的流式细胞术检测方法，其特征在于：步骤1）的测定流式细胞仪的上样速度，是这样操作的：

在流式上样管中加入一定的蒸馏水，称量管和水总重量，记为初重；然后以慢速进行上样，上样一定时间后立即停止上样，取下上样管，称量管和水总重量，记为末重；根据上样速度计算公式计算流式细胞仪在慢速状态下的上样速度，重复测定5次以上，计算平均值。

3.根据权利要求2所述的酵母浓度的流式细胞术检测方法，其特征在于：所述上样速度其计算公式为：

上样速度（ml/min）=（初重-末重）÷水密度（1g/ml）÷上样时间（min）。

4.根据权利要求1所述的酵母浓度的流式细胞术检测方法，其特征在于：步骤2）中，制备酵母悬液的方式是：取酵母液，用200目筛网过滤，再用酵母培养液或蒸馏水调整酵母浓度后得到酵母悬液。

5.根据权利要求4所述的酵母浓度的流式细胞术检测方法，其特征在于：所述酵母悬液，其中酵母浓度的数量级优选10⁶个/ml。

6.根据权利要求1所述的酵母浓度的流式细胞术检测方法，其特征在于：步骤3）所述的利用流式细胞仪测定酵母浓度，是这样操作的：

在分析软件中建立FSC-H/SSC-H散点图，取1管酵母悬液进行上样，调整并确定流式细胞仪的前向角散射光（FSC）和侧向角散射光（SSC）基本参数，FSC采用Line线性形式，SSC采用Log对数形式，在FSC-H/SSC-H散点图上圈定酵母范围；每个样品上样1min，根据圈定的酵母范围，分析酵母个数占总颗粒数的比例，计算1min读取到的酵母个数，根据酵母浓度计算公式计算酵母浓度，每个样品测定3次以上，计算平均值。

7.根据权利要求1所述的酵母浓度的流式细胞术检测方法，其特征在于：所述的酵母浓度计算公式：酵母浓度（个/ml）=1min读取酵母个数（个/min）÷上样速度（ml/min）×稀释倍数。