[发明专利]一种靶向纳米钻石载体和靶向药物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种靶向纳米钻石载体ND-PEG-Tf，其特征在于，它是以纳米钻石为载体，聚乙二醇为桥梁，由转铁蛋白通过共价偶联形成靶向载体ND-PEG-Tf，其粒径大小为294.5±94.3nm。

2.如权利要求1所述的一种靶向纳米钻石载体ND-PEG-Tf的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将羧基化的纳米钻石，在70-80℃真空干燥箱干燥过夜，按每毫克羧基化的纳米钻石加入0.05-0.2mL的无水N,N二甲基甲酰胺（DMF）溶剂，超声分散形成悬浊液，再按每毫克羧基化的纳米钻石加入0.4-0.6mL的二氯亚砜（SOCl₂），在65-70℃回流24h，在40-45℃下旋转蒸发掉过量的SOCl₂，得到酰氯化的纳米钻石，按每毫克酰氯化的纳米钻石加入0.5-0.8mL的无水DMF溶剂得到酰氯化的纳米钻石悬浊液；

（2）按酰氯化的纳米钻石与分子量为4000的PEG的质量比1：3-4，将PEG加入步骤（1）得到的酰氯化的纳米钻石悬浊液中，同时按每毫克酰氯化的纳米钻石加入0.1-0.2mL的三乙胺，在90℃回流24h，15000rpm下离心5min，用重蒸水洗涤5次，除去上清液，得沉淀物纳米钻石-聚乙二醇ND-PEG-OH，真空干燥；

（3）按每毫克ND-PEG-OH加入1.5-2mL的DMF溶剂，超声分散30min形成悬浊液，按ND-PEG-OH、琥珀酸酐（SA）和4-二甲胺基吡啶（DMAP）的质量比1：2-2.5：2-2.5，分别加入SA和DMAP，在90℃回流24h；15000rpm下离心，用重蒸水洗涤5次，除去上清液，获得ND-PEG-COOH沉淀物，真空干燥；

（4）按每毫克ND-PEG-COOH加入0.3-0.5mL pH8.0的硼酸缓冲溶液，超声分散30min形成悬浊液，接着加入2倍ND-PEG-COOH质量的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐（EDC），反应30min；

（5）然后，按ND-PEG-COOH与分子量为80KDa转铁蛋白（Tf）的质量比1：0.25-1，取Tf加入步骤（4）的反应液中，摇匀过夜；15000rpm离心5min，用重蒸水洗涤5次，除去上清液，得沉淀物纳米钻石-聚乙二醇-转铁蛋白（ND-PEG-Tf）冷藏即可。

3.一种靶向药物ND-PEG-Tf-DOX的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）按每毫克干燥的ND-PEG-Tf加入0.5-1mL蒸馏水，超声分散30min形成悬浊液，接着按ND-PEG-Tf与阿霉素（DOX）质量比100：4-7加入DOX，室温下摇3h；

（2）15000rpm离心5min，用重蒸水洗涤3次，除去上清液，沉淀物纳米钻石-聚乙二醇-转铁蛋白-阿霉素（ND-PEG-Tf-DOX）冷藏即可。