[发明专利]一种尾巨桉胚状体诱导育苗方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种胚状体诱导方法，具体涉及一种尾巨桉胚状体诱导育苗方法，属于桉树组培再生技术领域。

背景技术

桉树原产澳大利亚，是桃金娘科（Myrtaceae）桉树属（Eucalyptus）植物的统称，有1039个种、亚种和变种。由于桉树生长速度快、轮伐期短、耐干旱、耐瘦瘠、适应性广，且用途广泛，经济效益高，现已被世界近百个国家与地区引种，遍布于地中海地区、东南亚、美洲和非洲，目前已成为世界公认的三大人工林树种之一。根据FAO统计，桉树人工林占世界人工林总面积的10 %。近年来，在亚洲、中南美洲和非洲的热带地区，桉树人工林占造林面积70 % 以上。据统计，全世界桉树人工林面积超过2000万hm²。我国引种桉树已有120年历史，在17个省（区）种植，每年新营造桉树林达10万hm²，到2010年，中国桉树人工林面积达到313万hm²，占全国人工林面积的5%左右，年生产木材近4000万立方，占国内自主生产纸浆材的50%以上，每年带来的经济效益多达几千个亿。尾巨桉(E. urophylla×E. grandis)是尾叶桉(E. urophylla)与巨桉(E. grandis)的杂交种，具有明显的杂种优势，其树干通直、均匀，具有适应性广、耐寒性强，速生丰产等优点，是优良的工业材料，其种植面积已占到了桉树人工林面积的40%，成为我国南方热带、亚热带地区最重要的速生丰产造林树种之一。

近年来因转基因育种技术具有针对性强、育种时间短、效率高等优点，利用转基因技术培育桉树新种质越来越受到研究人员重视，而建立高效的组织培养再生体系是建立高效遗传转化体系的基础与前题。由于桉树是多年生木本植物，木质化程度高，细胞再分化不容易发生，因此愈伤组织诱导及不定芽分化困难，加之非胚性愈伤组织作为转化的受体材料时，易产生嵌合体，转化效率不高，而利用胚状体作为转化的受体材料，不仅可充分利用胚性细胞接受外源DNA能力强的优点，提高转化效率，而且胚状体来源一致，细胞分化的同步性好，可极大地降低嵌合体发少的概率。同时，在很多其他领域也有广泛应用，如植物离体快繁、人工种子制作、体细胞杂交、种质资源的保存等，特别是作为遗传转化受体具有如下优点：① 胚性细胞具有很强的接受外源DNA的能力，而且胚性细胞繁殖快，同步性好，是理想的基因转化感受态细胞。② 胚性细胞具有分散性好、细胞形状及细胞团大小比较一致、生长迅速、重现性好、易于控制等特点，是遗传转化的良好受体。③ 许多研究表明胚状体的发生多数是单细胞起源，因此转化获得的转基因植株嵌合体少。④ 由胚性细胞形成的胚状体具有两极性，即在发育过程可同时分化出芽和根，形成完整植株，减少了不定芽发生过程中的生根环节，对于不易诱导生根的物种意义显得尤为重要。⑤ 转基因的体细胞胚具有个体间遗传背景一致、无性系变异小、胚的结构完整、成苗快、数量大等许多优点，有利于转基因植株的生产和推广。