[发明专利]一种检测人PSCA基因突变的试剂盒无效
申请号: | 201310127239.0 | 申请日: | 2013-04-14 |
公开(公告)号: | CN104099406A | 公开(公告)日: | 2014-10-15 |
发明(设计)人: | 刘骁 | 申请(专利权)人: | 刘骁 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200123 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 psca 基因突变 试剂盒 | ||
1.一种检测人PSCA基因第一外显子突变的试剂盒,其特征在于,包含如下引物:
上游引物:5'- TCCAGCCTCTCCCCATTTGAG -3';
下游引物:5'- GCCAAGCCTGCCATCAACAG-3';
测序引物:5'- TCCAGCCTCTCCCCATTTGAG-3'。
2.根据权利要求1 所述的试剂盒检,包括如下步骤:
(1)样本DNA提取;
(2)使用权力要求1所示试剂盒中的扩增引物(SEQ NO1,SEQ NO2)对目的基因片段进行PCR扩增;
(3)对步骤(2)所得PCR产物进行纯化处理;
(4)将步骤(3)所得的纯化产物进行测序;
(5)结果分析。
3.根据权利要求2 所述的试剂盒,其特征在
于,所述的多重荧光PCR 的反应体系为50μl, 反应体系中含有:上游引物,下游引物,10mM的dNTP,Taq Buffer, 25mM的MgCl2, 5U/μl的Taq酶,25%的BigDye mix 溶液;DNA测序引物;125mM的EDTA溶液;100%乙醇溶液;70%乙醇溶液;HIDI溶液以及无菌去离子水;
根据权利要求3 所述的试剂盒,其特征在于,所述的PCR 扩增条件为:95摄氏度3分钟预变性,94摄氏度30秒变性,降温至55摄氏度35秒退火,再升温至72摄氏度40秒进行延伸,保持72摄氏度5分钟进行延伸修复;以上循环35次。
4.检测人PSCA基因第一外显子突变的试剂盒在胃癌,肠癌和膀胱癌易感性评估方面的应用。
5.检测人PSCA基因第一外显子突变的试剂盒在肠癌,肠癌和膀胱癌转移危险预测方面的应用。
6.检测人PSCA基因第一外显子突变的试剂盒在临床抗雄性激素类药物使用方面的应用。
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