[发明专利]糖链捕获物及其用途

说明书

本申请是申请日为2007年8月6日，申请号为：200780029447.X，名称为：“糖链捕获物及其用途”的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及使用指定糖链捕获物制备样品的方法以及通过所述方法获得的分析样品。本发明涉及糖链捕获物的制备方法、所述方法中使用的化合物、以及通过聚合所述化合物获得的聚合物。此外，本发明还涉及所述糖链捕获物的应用，例如，所述糖链捕获物的应用方法、糖链微阵列(sugar chain microarray)、所述糖链微阵列的应用、糖链亲和珠以及所述糖链亲和珠的应用。

背景技术

生物聚合物是指一般概念上的糖链、糖蛋白、糖肽、肽、寡肽、蛋白质、核酸或脂质等。

此外，这些生物聚合物在例如医学、细胞工程和器官和医学工程等的生物技术领域中起重要作用。阐明使用这些物质的生物反应的控制机理涉及到生物技术领域的发展。

在这些生物聚合物中，糖链的多样性极为丰富，并且是参与天然存在生物体的多种功能的物质。在很多情况下，糖链在体内作为与蛋白质或脂质等相结合的糖偶联物存在，且是体内重要组分之一。现已确定体内的糖链与细胞间信息的传递和蛋白质功能或相互作用的调控等密切相关。

此外，术语“糖链”是通过糖苷键与单糖（例如，葡萄糖、半乳糖、甘露糖、海藻糖、木糖、N-乙酰葡糖胺、N-乙酰半乳糖胺或唾液酸等）及其衍生物偶联的分子链的通称。

具有糖链的生物聚合物的实例包括植物细胞的细胞壁中对细胞稳定性起作用的蛋白聚糖，影响细胞分化、群增长、粘附或迁移等的糖脂和参与细胞内相互作用或细胞识别的糖蛋白等。包含在这些生物聚合物中的糖链在控制高精度生物反应中的机理，及其与生物聚合物间功能上的相互辅助、放大、调节或妨碍的机理已逐渐明确。此外，在这些糖链与细胞分化、群增长、细胞粘附、免疫性和细胞中的恶性变化（癌化）的关系逐渐明确的情况下，预期新的研发计划能够通过这些糖链工程与医学科学、细胞工程或组织和医学工程间的密切关系得到部署。

在专利文件1中，公开了能够与此类糖链发生特异性反应的物质，以及使用所述物质分离糖链的方法。

专利文件1：国际公布小册第2004/058687号

发明内容

此外，在专利文件1中描述了采用三氟乙酸或酸性树脂等通过酸处理从糖链捕获物中释放（切割）利用糖链捕

获物捕获的糖链的方法。将糖链暴露在如此苛刻的条件下会导致糖链的降解，例如导致生物样品中糖链末端结合的唾液酸残基的分离，其易于在酸性条件下发生分离。因此，要求在更温和的条件下切割糖链。此外，在很多情况下，待与糖链结合的唾液酸的存在以及结合位点与疾病相关，因此要求在唾液酸的理想状态下分析糖链。即使在分析前的预处理步骤中仅部分唾液酸发生分离，也不能获得糖链的正确信息。

因而，本发明提供了制备样品的方法以及通过此方法获得的分析样品，所述方法能够通过简单的操作从包含糖链和/或糖衍生物的生物样品中分离和纯化糖链和/或糖衍生物以获得分析样品。此外，本发明还提供上述样品制备方法中所用的糖链捕获物的制备方法、可用于所述制备方法的单体、以及通过聚合此单体获得的聚合物。此外，本发明提供了上述样品制备方法的应用。

本发明提供了：

（1）样品的制备方法，其中通过在物质A的酰肼基团（hydrazide group）与糖链和/或糖衍生物的还原末端之间形成腙，使包含酰肼基团的物质A与糖链和/或糖衍生物相结合；

（2）如（1）所述的样品的制备方法，其中物质A包括含有发色团或荧光团的部分；

（3）如（1）所述的样品的制备方法，其中物质A选自以下物质或其盐：