[发明专利]防治人参灰霉病和黑斑病的生物农药

说明书

本申请为申请号:201210498378X,申请日：2012年11月29日，发明名称：一株人参病害生物防治菌株的获得及应用的分案申请。 

技术领域

本发明属于植物生物防治技术领域，具体涉及防治人参灰霉病和黑斑病的生物农药。 

背景技术

人参是一种名贵的中药材，在我国具有悠久的药用历史，近些年由于市场需求的增长，人工栽培人参规模也随之增加。在人参种植过程中，病害的发生和发展将会对产量和品质造成严重的影响，有效控制病害是人参生产中的重要环节。目前，防治病害的主要方法是利用化学农药在病害发生期进行控制，但长期使用化学农药或不合理使用会导致人参中农药残留超标、品质下降、污染环境和病原菌产生抗药性等不良后果的出现。自2007年以来，我国人参产品出口数量呈下降趋势，出口的人参常因农药残留超标不时有被退回的现象发生，国际市场信誉不良。因此开展人参病害生物防治研究，获得生防菌株和有效产品，减少或替代化学农药的使用，对于保障我国人参生产安全，加快人参产业可持续发展进程，提高我省人参产品的质量及国际市场竞争力具有重要意义。 

植物内生菌是一类定殖在植物体内与植物建立和谐关系的一类微生物，有些菌株具有拮抗、促生等生物学功能，可产生多种生物活性物质，特别是在新的抗植物病虫害物质方面，为我们提供了一类新的微生物资源，目前已有多种植物的功能内生菌报道。因此，从人参植株体内获得具有较好抗菌和生防作用的新型细菌菌株，进而生产出高效的生物菌剂，将有利于人参病害的防治，减少化学农药的污染。 

发明内容

本发明的目的是为克服农药残留超标问题，而提供一种人参病害防治生物农药。 

防治人参灰霉病和黑斑病的生物农药，是由下述方法制得，它包括： 

1）保藏编号为CGMCC No.6679的甲基营养型芽孢杆菌，在种子培基中，培养；制备种子培养液；所述的种子培养基，包括：胰蛋白胨10 g/L、酵母膏10 g/L、NaCl 5 g/L，pH为7.0；

2）种子培养液接种于发酵培养基中， 28℃恒温摇床培养，制得发酵液；所述的发酵培养基包括：葡萄糖30 g/L、淀粉15 g/L、酵母浸粉15 g/L、NaCl 5 g/L、K₂HPO₄ 1 g/L ，pH为8.0；

步骤1）所述的培养，培养时间为10 h；

步骤2）所述的摇床培养，培养时间为96h；

所述的发酵液稀释5倍。

本发明提供了人参内生拮抗细菌NJ13，是一种甲基营养型芽孢杆菌，是从人参茎部分离、筛选得到的；其发酵菌液及其滤液能拮抗人参常见7种病害及其它常见植物病害，特别是对人参灰霉病和人参黑斑病防治效果更佳；它来源于人参植株，对人参安全；发酵过程中所用原料成本较低；抗菌活性物质制备简单，操作方便，防治效果好；能有效的解决人参农药防治残留严重的问题，是一种可产业化生产的、广谱、高效的绿色生物农药。 

附图说明

图1 为NJ13菌株菌体对3种人参病原菌的抑制作用图，A：人参菌核病菌；B：人参立枯病菌；C：人参黑斑病菌； 

图2 为NJ13菌株的抗菌谱的测定，A：人参灰霉病菌；B：人参立枯病菌；C：人参锈腐病菌；D：人参根腐病菌；

图3 为NJ13菌株菌落形态和染色观察，A：菌落形态；B：革兰氏染色形态；

图4 为NJ13菌株的细胞形态；

图5 为NJ13菌株的发酵稀释液对人参灰霉病菌的田间防治作用图，A：清水对照；B：发病后喷施NJ13菌株5倍稀释液的防治效果；

图6 为NJ13菌株的发酵稀释液对人参黑斑病菌的田间防治作用图，A：清水对照；B：发病后喷施NJ13菌株5倍稀释液的防治效果。

具体实施方式

实施例1 人参内生拮抗细菌株NJ13的筛选