[发明专利]新型麦芽寡糖基海藻糖合成酶和麦芽寡糖基海藻糖水解酶在海藻糖生产中的应用

权利要求书

1.麦芽寡糖基海藻糖合成酶和麦芽寡糖基海藻糖水解酶在海藻糖生产中的应用，其特征是：所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；所述麦芽寡糖基海藻糖水解酶具有如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。

2.一种海藻糖的生产方法，其特征是：以淀粉为底物，通过双酶转化法制备海藻糖，所用酶包括麦芽寡糖基海藻糖合成酶和麦芽寡糖基海藻糖水解酶；

所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列； 

所述麦芽寡糖基海藻糖水解酶具有如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。

3.根据权利要求1或2所述的生产方法，其特征是：麦芽寡糖基海藻糖合成酶具有以下特性：

（1）最适作用温度

当pH 5.5温育60 min，最适作用温度60℃；

（2）最适作用pH

当60℃温育60 min，最适pH为5.5；

（3）热稳定性

当于pH 5.5温浴60 min，在高达65℃下稳定；

（4）pH稳定性

当于60℃温浴60 min，在pH 4.8-6.3下稳定。

4.根据权利要求1或2所述的生产方法，其特征是：麦芽寡糖基海藻糖水解酶具有以下特性：

（1）最适作用温度

当pH 5.3温育60 min，最适作用温度60℃；

（2）最适作用pH

当60℃温育60 min，最适pH为5.3；

（3）热稳定性

当于pH 5.3温浴60 min，在高达70℃下稳定；

（4）pH稳定性

当于60℃温浴60 min，在pH 4.5-6.5下稳定。

5.根据权利要求1或2所述的生产方法，其特征是：麦芽寡糖基海藻糖合成酶由基因表达而得，所述基因含有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列或其互补核苷酸序列，或者含有由SEQ ID NO:2因遗传密码子的兼并性而取代一个或多个碱基所形成的核苷酸序列或其互补核苷酸序列；麦芽寡糖基海藻糖水解酶由基因表达而得，所述基因含有SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列或其互补核苷酸序列，或者含有由SEQ ID NO:4因遗传密码子的兼并性而取代一个或多个碱基所形成的核苷酸序列或其互补核苷酸序列。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征是包括以下步骤：配制淀粉乳，调节pH为5.3-5.8，向其中加入高温淀粉酶进行反应，得到DE值为6-10的淀粉水解物后，高温灭酶；向淀粉水解物中加入麦芽寡糖基海藻糖合成酶、麦芽寡糖基海藻糖水解酶和普鲁兰酶，在50-65℃、pH5.3-5.5的条件下反应25-35 h，制得海藻糖。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征是：淀粉乳的质量浓度为20-35%。

8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征是：每升淀粉乳中加入0.2-0.5 ml的高温淀粉酶；每升淀粉水解物中加入100-300 U麦芽寡糖基海藻糖合成酶、300-900 U水解酶，0.2-1.0 mL普鲁兰酶。

9.根据权利要求6或8所述的制备方法，其特征是：高温淀粉酶在90-100℃下对淀粉进行酶解；高温淀粉酶的酶解时间为20-30 min；酶解后在132℃下灭酶1-10 min。

10.根据权利要求6、7或8所述的制备方法，其特征是：海藻糖的转化率为76.5-85.4%。