[发明专利]一种绿臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM及其编码序列的基因与应用

说明书

技术领域

本发明涉及分子遗传学领域，尤其是一种绿臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM及编码序列的基因与应用。 

背景技术

任何包含一个未成对电子的原子或原子团，均称之为自由基。生物体系主要遇到的是氧自由基，例如超氧阴离子自由基、羟自由基、过氧化氢、脂质过氧自由基、二氧化氮自由基、一氧化氮自由基、单线态氧和臭氧。细胞内的自由基来源包括紫外线的照射，电离辐射，药物，环境毒素，黄嘌呤氧化酶，内质网上的细胞色素P-450酶类和质膜NADPH氧化酶等。线粒体内膜上的氧化呼吸链被认为是细胞内氧自由基的主要来源。在较高浓度下，活性氧自由基对生物细胞的细胞结构、核酸、脂类和蛋白质造成损伤。造成DNA损伤，进一步引起复制错误、基因组不稳定、转录意外起始或终止，从而导致生物体变异或疾病发生；引起细胞膜流动性和通透性改变，导致细胞结构和功能改变；引起蛋白质氧化，导致蛋白质变性和失活。 

目前一些变异实验表明，慢性的氧化损伤尤其是来自炎症的慢性氧化损伤跟肿瘤发生有关。例如，溃疡性结肠炎常常伴随高发的结肠直肠癌。在自由基与神经系统疾病方面，由于大脑用氧量极高，外加富含多不饱和脂肪酸和参与氧化还原反应的金属离子如铁和铜，导致大脑成为容易被氧离子自由基攻击的器官。抗氧物目前在国内外应用广泛, 需求量逐渐增多, 现在被用于预防治疗多种疾病, 如心血管疾病、肿瘤、关节炎、肾功能损伤、糖尿病、自身免疫性疾病等。此外，抗氧化物近年在化妆品领域的应用兴起,尤其是天然抗氧化物。由于皮肤的光老化作用是由于紫外线诱导皮肤细胞产生大量的氧自由基堆积而造成的。现在许多护肤品中加入抗氧化剂, 有减少雀斑、防辐射、延缓衰老、调节免疫和提高皮肤自我保护的作用。 

关于衰老的学说有很多种，其中自由基学说是较为广泛认可的一种。有研究发现氧气消耗和衰老之间存在联系，例如低耗氧可以解释为什么蜂王寿命能比会飞的工蜂寿命长50倍；大型动物单细胞耗氧量平均比小型动物细胞少所以寿命一般较长；长寿物种的抗氧化系统往往较为强大，如动物中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽、类胡萝卜素类和维生素E含量较高。 

除此之外，活性氧自由基还与多种人类疾病有关，如心脑血管疾病、缺血再灌注损伤、类风湿性关节炎和糖尿病等。 

为了抵抗活性氧自由基对机体的损害，在漫长的进化过程中生物体形成多种不同的自由基清除系统，包括非基因编码的小分子物质，如尿酸、维生素C、维生素E、胡萝卜烯类、硫辛酸和辅酶Q等；基因编码的大分子抗氧化酶类，如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶、过氧化物酶、硫氧还蛋白酶系统和谷胱甘肽酶系统；基因编码的小分子抗氧化肽类，如从两栖类蛙科动物皮肤中发现的各种小分子抗氧化多肽。各种不同类型的自由基清除剂在医药和化妆品领域具有极大的应用潜力，如维生素C、超氧化物歧化酶(SOD)和小分子抗氧化多肽。 

绿臭蛙（Rana margaratae)属于两栖纲无尾目蛙科臭蛙属。目前关于绿臭蛙来源抗氧化多肽的研究还没有报道。 

发明内容

技术要求 

本发明所要解决的技术问题是提供一种绿臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM。

本发明还要解决的技术问题是提供上述蛋白的编码序列。 

本发明还要解决的技术问题是提供上述蛋白在制备抗氧化药物或化妆品添加剂的应用。 

本发明是这样实现的：一种绿臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM，它是具有序列表中SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的蛋白，或者是将SEQ ID NO：2的氨基酸残基序列经过一个以上氨基酸残基的取代、缺失或添加，且具有与SEQ ID NO：2的氨基酸残基序列相同活性的由SEQ ID NO：2衍生的蛋白质。 

所述的绿臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM具有序列表中SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；该绿臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM为直链多肽，含有27个氨基酸残基，分子量为2995.71    Da，等电点为9.78。 

绿臭蛙抗氧化肽odorranain-H-OM的编码基因，它是下列核苷酸之一： 

（1）序列表中SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；

（2）编码序列表中SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的多核苷酸；

（3）在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID NO：1限定的核苷酸序列杂交的核苷酸序列。