[发明专利]一种妊娠期高血压疾病小鼠模型的建立方法无效
| 申请号： | 201310131673.6 | 申请日： | 2013-04-16 |
| 公开（公告）号： | CN103173404A | 公开（公告）日： | 2013-06-26 |
| 发明（设计）人： | 李力;韩健;胡炯宇;李怡琳;刘晓洁 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学第三附属医院 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073;A01K67/027 |
| 代理公司： | 重庆市恒信知识产权代理有限公司 50102 | 代理人： | 刘小红 |
| 地址： | 400042 重*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 妊娠期 高血压 疾病 小鼠 模型 建立 方法 | ||
1.一种妊娠期高血压疾病小鼠模型的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将新鲜C57BL/6小鼠胎盘采用冰PBS缓冲液洗净后剪碎成胎盘碎片；取胎盘碎片放置在0.1～0.2mol/L的NaCl溶液中，2～6℃振荡过夜，其中所述NaCl溶液中添加了1～2%的青-链霉素；取上清，差速离心：1000g，10min，弃沉淀；10000g，10min，弃沉淀；100000g，60min，弃上清，得合体滋养细胞微绒毛膜富集沉淀；将合体滋养细胞微绒毛膜富集沉淀以2～6℃的PBS缓冲液洗涤，再以2～6℃的PBS缓冲液重悬，其中所述重悬步骤中PBS缓冲液中含3-7%的蔗糖，保存于-20℃备用，得合体滋养细胞微绒毛膜混悬液；
（2）将上述步骤（1）所得的合体滋养细胞微绒毛膜混悬液通过尾静脉注射回输入同种品系的孕鼠体内。
2.根据权利要求1所述的一种妊娠期高血压疾病小鼠模型的建立方法，其特征在于：所述步骤（1）中的C57BL/6小鼠为8～12周龄，妊娠16～20天，体重25～30g。
3.根据权利要求1所述的一种妊娠期高血压疾病小鼠模型的建立方法，其特征在于：所述步骤（1）中的胎盘碎片大小为1～2mm3。
4.根据权利要求1所述的一种妊娠期高血压疾病小鼠模型的建立方法，其特征在于：所述步骤（1）中胎盘碎片质量和NaCl溶液体积之比为1g︰40～60ml。
5.根据权利要求1所述的一种妊娠期高血压疾病小鼠模型的建立方法，其特征在于：所述步骤（2）中每只小鼠注射合体滋养细胞微绒毛膜混悬液中总蛋白含量为0.004～0.02μg。
6.根据权利要求1所述的一种妊娠期高血压疾病小鼠模型的建立方法，其特征在于：所述步骤（2）中孕鼠为雌性C57BL/6小鼠，小鼠年龄为8～12周龄，孕8～20天，体重19～30g。
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