[发明专利]一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry9C的制备方法

权利要求书

1.DNA分子，为如下a）-c）中任一：

a）序列表中序列1的第109-1548位核苷酸所示的DNA分子；

b）序列表中序列1所示的DNA分子；

c）与a）或b）所限定的DNA分子至少具有98%的同一性，且编码序列2或序列2的第37-516位氨基酸所示蛋白质的DNA分子。

2.含有权利要求1所述DNA分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。

3.根据权利要求2所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体为重组表达载体或重组克隆载体。

4.根据权利要求3所述的重组载体，其特征在于：所述重组表达载体中启动所述DNA分子转录的启动子为T7启动子；

所述重组表达载体具体为将所述DNA分子插入到质粒pET28a的多克隆位点处得到的重组质粒。

5.由权利要求1所述DNA分子转录所得的RNA分子。

6.蛋白质，为如下I）或II）：

I）序列表中序列2的第37-516位氨基酸组成的蛋白质；

II）序列表中序列2所示的蛋白质。

7.权利要求1所述的DNA分子，或权利要求2-4中任一所述的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌，或权利要求5所述的RNA分子，或权利要求6所述的蛋白质在制备具有杀虫活性的产品中的应用。

8.权利要求1所述DNA分子在提高大肠杆菌中苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry9C表达量中的应用；所述苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry9C为序列表中序列2所示蛋白质。

9.一种苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry9C的制备方法，包括如下步骤：

1）将权利要求2-4中任一所述的重组载体导入大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；

2）培养所述重组大肠杆菌，进行诱导表达，收集并裂解菌体，获得苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry9C；

所述苏云金芽孢杆菌晶体融合蛋白Bt Cry9C为序列表中序列2所示蛋白质。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤2）中，所述诱导表达为：向培养有所述重组大肠杆菌的培养液中加入IPTG至终浓度为1mM，30℃震摇培养9小时。