[发明专利]一种棉花Gh FPF1蛋白及其编码基因和应用有效
申请号: | 201310136123.3 | 申请日: | 2013-04-18 |
公开(公告)号: | CN103183732A | 公开(公告)日: | 2013-07-03 |
发明(设计)人: | 喻树迅;王小艳;范术丽;宋美珍;庞朝友;魏恒玲 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院棉花研究所 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C12N15/29;C12N15/84;C12N5/10;C12N1/21;C12N15/11;A01H5/00 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 棉花 gh fpf1 蛋白 及其 编码 基因 应用 | ||
技术领域
本发明涉及一种棉花蛋白及其编码基因和应用。
背景技术
短季棉的推广是解决我国粮棉争地、保证粮食安全的重要途径。早熟型是棉花品种的重要性状之一,而花期是衡量棉花熟性的重要指标之一。
花是植物的次生器官,高等植物的地上部分来自茎端分生组织(shoot apical meristem,SAM),即位于茎顶端的一群未分化的小细胞,茎端分生组织进而发育成茎、叶、花序分生组织及花分生组织。开花决定过程是植物生殖生长启动的第一个阶段,是花发端和花器官形成的基础,所以开花决定过程直接控制作物生育期的早晚。因此克隆棉花开花相关基因,对其进行表达分析和转基因功能验证,为短季棉育种提供优质的基因资源。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种蛋白,名称为Gh FPF1,来源于棉花(Gossypium spp)。
本发明所述蛋白是如下1)或2)的蛋白:
1)序列表中的SEQ ID №.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
2)将序列表中的SEQ ID №.2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物开花相关的由1)衍生的蛋白质。
序列表中SEQ ID №.2所示的氨基酸序列由109个氨基酸残基组成。
上述1)和2)中的Gh FPF1蛋白可人工合成,也可先合成其编码基因,再进行生物表达得到。上述1)和2)中的Gh FPF1蛋白的编码基因可通过将序列表中SEQ ID №.1的第8-334位核苷酸所示的DNA序列缺失一个或几个氨基酸残基的密码子,和/或进行一个或几个碱基对的错义突变后得到。
编码所述Gh FPF1蛋白的核酸分子也属于本发明的保护范围。
所述核酸分子可以是DNA,如cDNA、基因组DNA或重组DNA;所述核酸分子也可以是RNA,如mRNA、hnRNA或tRNA等。
本发明的又一个目的是提供所述蛋白的编码基因。
所述编码基因具有下述核苷酸序列之一:
1)序列表中SEQ ID №:1第8-334位的核苷酸序列;
2)编码序列表中SEQ ID №:2蛋白质序列的多核苷酸序列;
3)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID №:1限定的DNA序列杂交的核苷酸序列;
4)与1)或2)或3)限定的DNA序列具有90%以上同源性,且编码相同功能蛋白质的DNA序列;具体的,所述同源性为95%以上;再具体的为96%以上;再具体的为97%以上;再具体的为98%以上;再具体的为99%以上。
上述高严谨条件可为用6×SSC,0.5%SDS的溶液,在65℃下杂交,然后用2×SSC,0.1%SDS和1×SSC,0.1%SDS各洗膜一次。
其中,序列表中的SEQ ID №:1由401个核苷酸组成,其开放阅读框架(ORF)为自5′末端第8-334位核苷酸,编码序列表中SEQ ID №:2所示的蛋白质,即本发明所述的Gh FPF1蛋白。
含有上述核酸分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌也属于本发明的保护范围。
所述重组载体可为重组表达载体,也可为重组克隆载体。
所述重组表达载体可用现有的表达载体构建。所述表达载体还可包含外源基因的3’端非翻译区域,即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。所述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3’端。使用所述基因构建重组表达载体时,在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子,它们可单独使用或与其它的启动子结合使用;此外,使用本发明的基因构建重组表达载体时,还可使用增强子,包括翻译增强子或转录增强子。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选,可对所用植物表达载体进行加工,如加入在植物中表达可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、GFP基因、萤光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除莠剂基因)等。从转基因植物的安全性考虑,可不加任何选择性标记基因,直接以逆境筛选转化植株。
扩增本发明所述编码基因全长或其任意片段的引物对也属于本发明保护的范围。
本发明的另一个目的是提供本发明所述蛋白、编码基因和含有所述编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在如下1)-3)至少一种中的应用:
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