[发明专利]一种RTN4B相关多肽及其制备与应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种RTN4B相关多肽及其制备与应用。

背景技术

RTN4B属于reticolon家族（RTNs），因含有特殊的内质网定位而得名，具有保守的RHD结构框（reticulon-homology domain）。该家族含有四个基因，RTN1、RTN2、RTN3和RTN4，其中关于RTN4的研究报道较多。RTN4（又名Nogo/ASY/RTN-X）基因有多个可变剪接本，主要编码RTN4A（GenBank登录号AF148537），RTN4B（GenBank登录号AF148538）和RTN4C（GenBank登录号AF087901）三种蛋白，其它一些剪接本多在睾丸中特异性表达[Oertle T,Schwab ME.Nogo and its paRTNers.Trends Cell Biol.2003Apr;13(4):187-94.]。

RTN4B在除了肝脏以外的其他所有正常组织中广谱表达，前人的研究工作提示RTN4B参与调控细胞凋亡和肿瘤生长。Tsujimoto等人发现RTN4B能够和Bcl-2，Bcl-xL相互作用并将Bcl-XL及Bcl-2招募到内质网上，逆转Bcl-XL及Bcl-2的凋亡抑制作用[Tagami S,Eguchi Y,Kinoshita M,Takeda M,Tsujimoto Y.A novel protein,RTN-XS,interacts with both Bcl-XL and Bcl-2on endoplasmic reticulum and reduces their anti-apoptotic activity.Oncogene.2000Nov23;19(50):5736-46.]。Yutsudo等人发现RTN4B在小细胞肺癌的样本中出现转录抑制，而过量表达RTN4B可以显著促进肿瘤细胞的凋亡[Li Q,Qi B,Oka K,Shimakage M,Yoshioka N,Inoue H,Hakura A,Kodama K,Stanbridge EJ,Yutsudo M.Link of a new type of apoptosis-inducing gene ASY/Nogo-B to human cancer.Oncogene.2001Jul5;20(30):3929-36.]。但是，Schwab小组指出RTN4B的表达在很多肿瘤组织来源的EST数据库中都有支持，而且RTN4B在SaOS-2或CHO细胞中没有促进细胞凋亡的迹象[Oertle T,Merkler D,Schwab ME.Do cancer cells die because of Nogo-B?Oncogene.2003Mar6;22(9):1390-9.]。因此，RTN4B调控肿瘤生长的机制是否与细胞凋亡有关还尚无定论。但是，近年来的研究进一步发现RTN4B很可能与血管重建、甚至血管新生有关。2004年，Acevedo等人发现RTN4B在哺乳动物血管内皮细胞和平滑肌细胞中都有表达。RTN4B重组蛋白可以促进血管内皮细胞的迁移并抑制平滑肌细胞的迁移。RTN4A/B基因敲除小鼠在血管损伤后出现了异常加厚的血管壁，血管内腔缩小，通过腺病毒载体将RTN4B重新导入到小鼠体内，这种异常增厚的血管壁又能够恢复正常的形态[Acevedo L,Yu J,Erdjument-Bromage H,Miao RQ,Kim JE,Fulton D,Tempst P,Strittmatter SM,Sessa WC.A new role for Nogo as a regulator of vascular remodeling.Nat Med.2004Apr;10(4):382-8.]。随后，Miao等人筛选到了RTN4B在血管内皮细胞表面的受体分子NgBR[Miao RQ,Gao Y,Harrison KD,Prendergast J,Acevedo LM,Yu J,Hu F,Strittmatter SM,Sessa WC.Identification of a receptor necessary for Nogo-B stimulated chemotaxis and morphogenesis of endothelial cells.Proc Natl Acad Sci U S A.2006 Jul18;103(29):10997-1002.]。敲减实验证明RTN4B和NgBR之间的相互作用是VEGF血管源性分子诱导血管新生所必需的。在斑马鱼模式生物中发现，RTN4B-NgBR的相互作用能够通过激活细胞内的Akt通路调控血管新生[Zhao B,Chun C,Liu Z,Horswill MA,Pramanik K,Wilkinson GA,Ramchandran R,Miao RQ.Nogo-B receptor is essential for angiogenesis in zebrafish via Akt pathway.Blood.2010Dec9;116(24):5423-33.]。