[发明专利]一种黄绿蜜环菌的深层发酵及其应用

权利要求书

1.一种黄绿蜜环菌的深层发酵方法，其特征在于，所述黄绿蜜环菌的深层发酵方法包括以下步骤：

采集野生黄绿蜜环菌子实体，分离纯化菌种；

纯化的黄绿蜜环菌菌种进行菌种筛选；

筛选的菌种进行驯化培养；

驯化的黄绿蜜环菌菌种进行深层发酵生产；

从发酵液收集黄绿蜜环菌菌丝体。

2.如权利要求1所述的黄绿蜜环菌的深层发酵方法，其特征在于，所述采集野生黄绿蜜环菌子实体，分离纯化菌种的具体步骤为：

将子实体菌柄根部泥土剔除，装入无菌牛皮纸袋中，每袋装1个；在无菌条件下，从菌褶和菌柄结合部位用组织分离法或孢子分离法分离黄绿蜜环菌菌种，用PDA培养基培养；对分离的菌种进行转接、纯化。

3.如权利要求1所述的黄绿蜜环菌的深层发酵方法，其特征在于，所述纯化的黄绿蜜环菌菌种进行菌种筛选的具体步骤为：对纯化的菌种进行形态、生理生化特征检测，筛选出目标菌株。

4.如权利要求1所述的黄绿蜜环菌的深层发酵方法，其特征在于，所述筛选菌种进行驯化培养的具体步骤为：

对菌株进行多种碳源、氮源、C/N、无机盐、维生素的培养基组方和培养条件筛选、人工驯化，选出最佳培养基组方：10～30％马铃薯浸提液、10～30％豆芽浸提液、5～10％葡萄糖、1～5‰KH₂PO₄、1～5‰MgSO₄、0.1～1‰微量盐、0.1～1mg/L VB₁、0.1～1mg/L VB₂、pH5.5～7.5，20～30℃培养。

5.如权利要求1所述的黄绿蜜环菌的深层发酵方法，其特征在于，所述驯化的黄绿蜜环菌菌种进行深层发酵生产的具体步骤为：

对驯化菌株进行深层发酵，优选出发酵培养基组方：10～30％马铃薯浸提液、10～30％黄豆芽浸提液、0.1～1mg/L复合VB、pH5.5～7.5；发酵条件：5～30％接种量、50～250mL/500mL摇瓶装量、20～30℃摇床温度、50～250rpm摇床转速、7～20d发酵周期。

6.如权利要求1所述的黄绿蜜环菌的深层发酵方法，其特征在于，所述从发酵液收集黄绿蜜环菌菌丝体的具体步骤为：

对黄绿蜜环菌发酵液进行离心，离心速度为1000～3000rpm，时间为5～20min，得到沉淀部分菌丝体；菌丝体用纯净水洗3～7次，真空冷冻干燥，温度为40～60℃。

7.一种如权利要求1所述的深层发酵方法制备的黄绿蜜环菌在饮料、口服液、调味品、膳食食品、保健药膳中的应用。