[发明专利]用N-乙酰半胱氨酸(NAC)抗卵巢衰老

说明书

技术领域

本发明涉及用N-乙酰半胱氨酸(NAC)抗卵巢衰老的方法，属于生物与新医药领域。 

背景技术

N-乙酰半胱氨酸(N-Acetylcysteine，简称NAC)，是谷胱甘肽的前体，分子中含有活性巯基(-SH)，可对抗不同原因所致的组织氧化损伤。NAC是一种具有研究价值的用途广泛的药物，在呼吸、心血管、神经系统和AIDS的治疗等方面均能发挥一定的作用。NAC作为一种巯基供给体，除具有上述作用外，主要还是一种抗氧化剂，对体内氧自由基(超氧阴离子、过氧化氢、羟自由基等)具有明显的拮抗作用，可清除已生成的自由基，调节细胞的代谢活性，预防DNA的损伤，调整基因的表达和信号转导系统，抗细胞凋亡，抗血管生成，抑制恶性肿瘤发展，抑制新生物的生成和转移等作用，而且在临床和实验中都得到了广泛的应用。 

在将NAC作为抗氧化剂进行研究的例子中，有几个效果比较明显的实验。2003年，Lin Liu和Keef等人便发现NAC可以通过降低胚胎内氧化应激水平来防止由环境污染物砷引起的端粒损耗、染色体末端融合以及细胞坏死的发生。2005年，Sablina AA利用NAC成功延缓了抑癌基因P53敲除掉的老鼠模型中的肿瘤发生。2007年，Tothova Z等人在对重要转录因子FOXO的研究中，发现NAC可以减缓由于FOXO表达降低造成的病理性变化。2009年，Roman V.等人也发现了NAC可以缓解由BMAL1表达降低诱发的卵巢早衰的相关症状。 

本研究发现，通过口服NAC的方法可以抵抗雌鼠增龄过程中发生的卵巢衰老，利用NAC可以有效清除机体内氧化物这一功能，减少体内的ROS，可以减轻卵巢中DNA受损程度，提高卵子的质量，从而使受孕成功率大大增加，由此延长雌性小鼠的生殖年龄，由于人类和小鼠的雌性生殖衰老过程相似，该发明的结果也适用于延缓人类女性的卵巢衰老，只是在NAC用量上会有所不同。除直接用药外，在保健品中加入一定量的NAC，也可以对延缓女性衰老、延长生殖年龄具有重要作用。因此，本发明为延缓雌性生殖衰老的制药提供直接的根据。 

发明内容

本发明是一种通过口服NAC抗卵巢衰老的方法。实验中采用昆明雌鼠，对实验组采取口服1mM、0.1mM高低两种浓度NAC的方法，来检测NAC在延缓昆明雌鼠卵巢衰老方面的作用。研究结果表明，在持续喂药7至12个月后，0.1mM NAC喂药组雌鼠所产后代总数高于同龄对照组雌鼠。对于各组雌鼠进行超排并进行纺锤体免疫荧光染色的结果表明NAC可以在一定程度上 维持卵子的数量和质量。同时，喂药12个月的雌鼠卵巢中的衰老相关基因Sirt1、Sirt2、细胞增殖相关基因C-myc表达量及端粒酶活性、端粒长度均高于同龄对照组雌鼠，更接近于年轻对照组。 

附图说明

图1为用NAC喂药不同时间后KM雌鼠的生仔数目。A：用1mM和0.1mM NAC喂药32-57周后每只小鼠见栓后生仔数目分布趋势图，与没有喂药(0mM NAC)的同龄小鼠进行比较；B：7-8月龄、9-10月龄、11-12月龄喂药小鼠的平均生仔数量，与没有喂药同龄小鼠进行比较，以6-8周龄年前KM雌鼠作为对照。从图中可以看到，在7-8月龄时0.1mM NAC喂药小鼠生仔数量显著多于同龄未喂药组小鼠。在9-10月龄和11-12月龄时NAC喂药组平均生仔数较未喂药组有少量增加，但无显著性差异。 

图2为用NAC喂药6个月和12个月后各组KM雌鼠超排得到卵子的数量。对两个年龄段的各组小鼠施以一定量的激素使其超数排卵，将输卵管划破后释放出卵泡，此时记录每只雌鼠取到的卵子数量及碎裂卵子数量。统计结果发现，与6-8周龄未喂药年轻KM雌鼠相比随着小鼠年龄的增加小鼠的排卵数量明显减少，而且NAC喂药6个月并没有明显减少老年小鼠产生的碎裂卵子比率，但是与同龄未喂药小鼠相比NAC喂药12个月则显著地降低了碎裂卵子的比率。