[发明专利]一种以胚芽鞘节作为外植体的玉米再生体系的建立方法

权利要求书

1.一种以胚芽鞘节为外植体的玉米再生方法，包括以下步骤：

1）将灭菌的玉米种子置于发芽培养基中培养，萌发获得幼苗；

2）从上述步骤1）中得到的幼苗上切取胚芽鞘节，接种于愈伤组织诱导培养基上诱导愈伤组织并继代培养；

3）将上述步骤2）中得到的愈伤组织置于胚状体诱导培养基中，得到玉米愈伤组织胚状体；

4）将上述步骤3）中得到的愈伤组织胚状体置于再生培养基中，得到再生苗；

5）将上述步骤4）中得到的再生苗置于生根培养基中，获得具有3-4条根的玉米再生植株；

上述发芽培养基是MS＋麦芽糖40g/L＋酶水解酪蛋白0.1g/L＋谷氨酰胺0.5g/L＋2-吗啉乙磺酸2g/L＋MgCl₂·6H2O 1.6g/L＋抗坏血酸 0.1g/L＋6-BA 3mg/L＋毒莠定0.01g/L；

愈伤诱导培养基是MS＋蔗糖 30g/L＋维生素B₁0.5mg/L＋酶水解酪蛋白 0.5g/L＋脯氨酸 1.5g/L＋硝酸银 5mg/L＋2,4-D 1.5-5mg/L＋毒莠定 0-0.001mg/L；

胚状体诱导培养基是MS＋蔗糖 30g/L＋脯氨酸 0.7g/L＋6-BA 2mg/L；

再生培养基是MS＋蔗糖 20g/L＋肌醇 0.1g/L。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤2）中所述的胚芽鞘节是指幼苗凸起的顶端分生组织。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于步骤2）中所述的继代培养是将所获得的愈伤组织在愈伤组织诱导培养基上培养增殖，得到增殖的愈伤组织。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于步骤6）获得的再生植株需进行炼苗后再移栽到土壤中。