[发明专利]一种畜禽表皮中松香酸含量的分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及畜禽表皮中松香酸的分析方法，属于分析测试领域。

背景技术

脱毛是畜禽加工中的重要环节，一般由机械完成。但机械加工后鸭、鹅仍残存大量纤细绒毛，而猪的某些部位（如猪头、猪蹄）也难以达到完全脱毛的效果，因此必需增加“二次脱毛”工序。人工二次脱毛，耗时繁琐、劳动力成本高、生产效率低，绝大多数加工企业只有依赖脱毛剂。松香价格低廉、脱绒毛效果好，曾经是普遍使用的脱毛剂。随着社会食品安全意识提高，以及新型安全食品级粘合剂——松香甘油酯的问世，2009年，我国颁布《食品安全法》，禁止在畜禽加工生产中使用松香。松香甘油酯是松香和甘油酯化的产物，但价格相对较高，而且脱毛效果略差。事实上，中小企业受利益驱动，违禁使用松香加工畜禽的现象十分严重。

松香是松树含油树脂蒸去松节油后得到的透明固体物质，主要成分为松香酸和脱氢松香酸，是用于肥皂、造纸、油漆涂料等领域的重要化工原料。松香酸可导致哮喘、皮肤过敏，毒理学研究表明，松香酸可引起人体肺泡上皮细胞细胞溶解，并具有损伤DNA的活性。

虽然《食品安全法》明令禁止松香用于畜禽脱毛加工，但尚未建立畜禽加工中是否使用松香的鉴别方法，也未见畜禽中松香残留的检测方法研究报道。研究表明，松香加工畜禽后，在畜禽表皮中残留其主要成分松香酸。通过色谱方法检测畜禽表皮中的松香酸，鉴别畜禽加工中是否使用违禁脱毛剂，对于规范畜禽加工生产、保障畜禽产品质量安全、促进畜禽业健康发展、保护消费者身体健康具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于：针对一些在畜禽加工中使用违禁脱毛剂——松香的现象，提供一种畜禽表皮中松香主要残留物——松香酸的定性、定量分析方法。

本发明技术方案是：在屠宰加工后的生畜禽的表皮样品中加入稀碱溶液，经提取、固相萃取净化后，取得滤过液，再将滤过液采用高效液相色谱-紫外法（HPLC-UV）进行分析。

本发明所指的畜禽为屠宰加工后的生猪、生鸭、生鹅或生鸡。本发明操作简便、易于推广，可用于鉴别畜禽加工中是否使用松香脱毛、并对其中松香酸残留量进行分析，以保护消费者身体健康。

本发明所述的稀碱溶液为0.025～0.05 mol/L的 KOH水溶液；所述稀碱溶液与畜禽表皮样品比的体积与质量比为4～10∶1。

本发明所述提取是：在室温条件下，以超声波水浴振荡提取，时间为15～30 min，然后置于5000～10000 rpm的转速条件下离心10～20 min，取得提取液。

本发明所述的固相萃取条件为：在3～6 mL/500 mg强阴离子交换固相萃取小柱中，先采用甲醇和KOH水溶液活化后，再将所述提取液完全流过小柱，待空气抽干小柱后，用甲醇和甲酸的混合溶液洗脱，收集洗脱液，过0.22 μm微孔滤膜，取得滤过液。

本发明所述高效液相色谱-紫外法的色谱条件是：色谱柱为反相C18，流动相：甲醇和质量百分比浓度为0.02%磷酸水溶液的混合液，流速：0.8～1.2 mL/min，柱温：25～30℃，进样量：5～20 μL，多波长紫外检测器，检测波长：230 nm、240 nm和250 nm；定性方法为：根据标准样品的保留时间结合在230 nm、240 nm、250 nm三个波长之间的峰面积关系进行定性，三波长之间的面积关系1∶1.10～1.20∶0.70～0.80；定量方法为：以240 nm的峰面积按标准曲线外标法定量。

附图说明

图1为样品中松香酸残留量与峰面积的标准曲线图。

图2为松香酸标准溶液和不同肉鸭表皮样品中松香酸的HPLC色谱图。

具体实施方式

一、鸭表皮中松香酸的分析步骤：

1、松香酸的提取、净化：

分析样品：自农贸市场采购的光鸭，取其表皮，剁碎。

提取：称取剁碎的光鸭表皮样品2.0 g于50 mL的具塞离心管中，加入0.05 mol/L KOH水溶液15 mL，室温下超声波水浴提取20 min。然后5000 rpm离心15 min，取4 mL上清液。

固相萃取净化：LC-SAX固相萃取小柱（3mL/500mg，Supelco公司，美国）分别用3 mL甲醇和3 mL 0.05mol/L的KOH活化后，将上述4 mL上清液通过小柱，空气抽干30s，用4 mL甲醇和甲酸的混合液（甲醇和甲酸的体积比为19:1）洗脱洗脱，收集洗脱液，过0.22 μm微孔滤膜，取得滤过液。

2、高效液相色谱-紫外法（HPLC-UV）分析：