[发明专利]一种二乙酰氨乙酸乙二胺的有关物质及其检测方法

权利要求书

1.一种二乙酰氨乙酸乙二胺的有关物质，该化合物为N-乙酰基甘氨酰甘氨酸，结构式如下：

 其特征在于，该化合物的检测方法操作步骤包括：

（1）精密称取N-乙酰甘氨酰甘氨酸对照品适量，加水制成每1ml约含N-乙酰甘氨酰甘氨酸2.5μg的溶液，作为对照品溶液；

（2）精密称取二乙酰氨乙酸乙二胺原料药或含有二乙酰氨乙酸乙二胺的药物制剂样品适量，加水制成每1ml约含二乙酰氨乙酸乙二胺0.5mg的溶液，作为供试品溶液；

（3）分别精密量取供试品溶液与对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量。

2.根据权利要求1所述的N-乙酰甘氨酰甘氨酸的检测方法，其特征在于，色谱条件为：

（1）色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

（2）流动相：以0.4%庚烷磺酸钠的0.02mol/L的磷酸二氢钾水溶液（用磷酸调pH为3.0）为流动相；

（3）检测波长：200nm；

（4）流速：0.8ml/min。

3.根据权利要求1所述的N-乙酰基甘氨酰甘氨酸，在二乙酰氨乙酸乙二胺原料中含量不得过0.1%。

4.根据权利要求1所述的N-乙酰基甘氨酰甘氨酸，在含有二乙酰氨乙酸乙二胺的药物制剂中含量不得过二乙酰氨乙酸乙二胺标示量的0.3%。

5.根据权利要求1所述的N-乙酰基甘氨酰甘氨酸，其制备方法为：

1）N-乙酰基甘氨酰甘氨酸粗品制备：

将甘氨酸加入至2倍摩尔量的乙酸酐中，搅拌，升温至120℃，反应30分钟，降温至25℃，过滤，得滤液，滤液中加入柱层析硅胶拌匀，60℃减压干燥，粉碎，将样品硅胶粉末干法上样，利用硅胶柱进行层析分离(径高比为1：20，硅胶用量30倍），以乙酸乙酯：甲醇：冰醋酸（体积比10:5:1）为洗脱剂进行洗脱，等体积收集，分别编号，硅胶板TLC法监控收集洗脱液，TLC色谱条件：硅胶G板；展开剂：（乙酸乙酯：甲醇：冰醋酸=10:5:1），显色剂为溴甲酚绿的乙醇溶液（不明化合物点在溶剂前沿，N-乙酰氨基乙酸点Rf值0.4，N-乙酰基甘氨酰甘氨酸目标物点Rf值0.2，甘氨酸点Rf值0.02）；

合并含有N-乙酰基甘氨酰甘氨酸目标物的洗脱液，60℃减压浓缩至无溶剂流出，得淡黄色粘稠液体，降至室温，加入5倍体积乙酸乙酯，搅拌30分钟，过滤，固体物于105℃干燥2小时，得到N-乙酰基甘氨酰甘氨酸粗品；

2）N-乙酰基甘氨酰甘氨酸精制：

将N-乙酰基甘氨酰甘氨酸粗品，加入8倍体积甲醇丙酮混合液（1:1），搅拌，回流30分钟，降温至25℃，析出固体物，过滤，固体物于105℃干燥2小时，得到N-乙酰基甘氨酰甘氨酸。

6.根据权利要求5所述的N-乙酰基甘氨酰甘氨酸样品纯度高于99.0%。