[发明专利]基于表面增强散射拉曼光谱饲料中三聚氰胺的速测方法

权利要求书

1.一种基于表面增强散射拉曼光谱饲料中三聚氰胺的速测方法，其特征在于，包括步骤：

A、样品前处理：

采用正丁醇或乙酸乙酯为提取溶剂，获得待测饲料样品的提取液，所述待测饲料样品与提取溶剂的比按1g待测饲料样品加入5mL提取溶剂计；

采用酸性水溶液和有机溶剂作为净化萃取溶剂对所述提取液进行液液萃取净化，获得待测液，所述有机溶剂为乙酸乙酯：正丁醇体积比=6:1的混合液或乙酸乙酯；

B、制备检测试剂：

向纳米金胶体溶液或者纳米银胶体溶液中加入前处理后的待测液，并加入含有Cl^-的盐水溶液，涡旋混合均匀后，混合液为最后的上机检测液；

C、定性检测：

用激光能量为200mw/785nm激光源拉曼光谱对所述检测试剂进行光谱扫描，以707±4cm^-1为三聚氰胺的拉曼特征吸收位移；

D、定量检测：

以731±4cm^-1对应峰强进行归一化，以707±4cm^-1对应峰强度进行三聚氰胺含量计算。

2.根据权利要求1所述的基于表面增强散射拉曼光谱饲料中三聚氰胺的速测方法，其特征在于，所述步骤A包括以下任一种方法：

方法一：称取1.0g饲料，加入5mL正丁醇，涡旋震荡提取30s，12500rpm离心1min，移取上清液3mL，加入3mL PH=3-4的HCl水溶液，涡旋离心，移取下层液500uL，加入10μL1M浓度的NaOH溶液和500μL乙酸乙酯：正丁醇体积比=6:1的混合液，涡旋离心，移取上层液加入500μL pH=3-4的HCl水溶液，涡旋离心，下层液为待测液；

方法二：称取1.0g饲料，加入5mL乙酸乙酯，涡旋震荡提取30s，12500rpm离心，移取上清液3mL，加入3mLpH=3-4的HCl水溶液，涡旋离心，移取下层液500μL，加入10μL1M浓度的NaOH溶液和500μL乙酸乙酯，涡旋离心，移取上层液加入500μL pH=3-4的HCl水溶液，涡旋离心，下层液为待测液。

3.根据权利要求2所述的基于表面增强散射拉曼光谱饲料中三聚氰胺的速测方法，其特征在于，所述步骤B中，应用合成纳米粒子的方法合成纳米金胶体溶液或者纳米银胶体溶液，所述纳米金的粒径为50-60nm，取所述胶体溶液300-600μL，加入前处理后的待测液30-50μL，再加入1%NaCl溶液或0.05%CaCl₂溶液50-100μL，涡旋混合均匀后，混合液为最后的上机检测液。

4.根据权利要求3所述的基于表面增强散射拉曼光谱饲料中三聚氰胺的速测方法，其特征在于，所述步骤C中，光谱扫描时间10s，扫描次数2，平滑参数1。

5.根据权利要求4所述的基于表面增强散射拉曼光谱饲料中三聚氰胺的速测方法，其特征在于，所述步骤D中，以731cm^-1±4cm^-1对应峰强度为100单位，进行谱图归一化，通过数据处理使光谱图基线平滑，以707±4cm^-1对应峰强度进行三聚氰胺含量计算。